國(guó)內(nèi)關(guān)于羊肚菌人工馴化栽培的最早記錄是1983年(顧云龍 1983)。
在1883年《中國(guó)食用菌》雜志的第二期上,顧云龍發(fā)表了其對(duì)黑脈羊肚菌的引種馴化研究。
顧龍?jiān)疲?983)對(duì)甘南、臨潭、洮河林區(qū)的野生羊肚菌調(diào)研發(fā)現(xiàn),黑脈羊肚菌(M.angusticeps)子實(shí)體在云、冷杉林山谷伐木滑道下生長(zhǎng)得最多,其中有的菌絲休在枯枝落葉層下腐殖質(zhì)中的腐木上生長(zhǎng)發(fā)育,當(dāng)溫、濕度適宜時(shí)便形成子實(shí)體。
作者隨后對(duì)其進(jìn)行了孢子分離和栽培實(shí)驗(yàn),其中孢子分離方法為懸掛孢子彈射法(圖1~2 所示)。具體做法是:將羊肚菌子實(shí)休切棄帶泥的菌柄基部,用無(wú)菌水沖洗數(shù)次后置無(wú)菌箱內(nèi)的無(wú)菌燒杯中。接下來(lái)的操作均以無(wú)菌操作規(guī)范進(jìn)行:首先用75%的酒精棉球?qū)ρ蚨蔷訉?shí)體進(jìn)行表面消毒,用鐵絲彎鉤掛住菌柄基部,將子實(shí)體倒掛在三角瓶中,使羊肚菌菌蓋的最低端距瓶底培養(yǎng)基表面2 ~ 3 cm,塞上棉塞,置于16 ~ 18℃,并用 40 W日光燈照射,24 h左右,即可見(jiàn)到像一陣煙霧似的子囊孢子散落在培養(yǎng)基上(注:即便看不到彈射的孢子也沒(méi)關(guān)系)。隨后,在無(wú)菌條件下丟棄子實(shí)體,將三角瓶置于20℃恒溫培養(yǎng),待孢子萌發(fā)形成菌落后進(jìn)行純化、轉(zhuǎn)管操作,并鏡檢獲得的羊肚菌純菌種。
圖1懸掛法進(jìn)行孢子彈射分離(顧龍?jiān)?983)
顧龍?jiān)疲?983)所進(jìn)行的孢子萌發(fā)和轉(zhuǎn)管所用的培養(yǎng)基分兩種,其中1號(hào)培養(yǎng)基為:腐殖質(zhì)土浸出液300 mL(菇木周圍的土200 g加水500 mL煮沸過(guò)濾)、菇木浸出掖液100 mL(菇木50 g、加水300 mL煮沸過(guò)濾)、子實(shí)體浸出液100 mL(子實(shí)體25 g、加水300 mL煮沸過(guò)濾)、葡萄糖5 g、磷酸二氫鉀0.5 g、硫酸鎂0.5 g、尿素0.5 g、石膏粉1 g、瓊脂10 g,加水至500 mL;2號(hào)培養(yǎng)基以1號(hào)培養(yǎng)基中不添加子實(shí)體浸出液,其他成分相同;培養(yǎng)基pH 7.2 ~ 7.5之間,滅菌后備用。作者指出,20℃培育,1號(hào)培養(yǎng)基菌絲生長(zhǎng)較快,菌絲整體整齊、濃密、粗壯,7 ~ 10 d可長(zhǎng)滿斜面,2號(hào)培養(yǎng)基生長(zhǎng)較慢,菌絲參差不齊、稀疏、細(xì)弱,10 ~ 14 d長(zhǎng)滿斜面。
顧云龍所進(jìn)行的栽培實(shí)驗(yàn)以櫟木屑75%、麩皮15%、腐殖質(zhì)土5%、過(guò)磷酸鈣0.4%、葡萄糖1%、硫酸銨0.5%、磷酸二氫鉀0.05%、硫酸鎂0.05%、尿素1%、石膏粉1%為主,并以添加或不添加1%的羊肚菌子實(shí)體碎粉作為可選項(xiàng)進(jìn)行裝瓶、滅菌,接種、養(yǎng)菌完成后,進(jìn)行催菇處理(保持空氣濕度80% ~ 85%,散射光照射)。最終發(fā)現(xiàn),在添加有1%子實(shí)體碎粉的培養(yǎng)基上,16 ~ 20℃條件下,35 d可長(zhǎng)滿全瓶,55 d出現(xiàn)珊瑚型綠豆大的子實(shí)體原基,繼續(xù)培養(yǎng)至65 d,原基不再進(jìn)一步分化,在未添加羊肚菌子實(shí)體碎粉的固體培養(yǎng)基上,菌絲生長(zhǎng)慢,45 d僅生長(zhǎng)到全瓶的1 / 2 , 繼續(xù)培養(yǎng)至65 d,未形成原基。
雖然作者(顧龍?jiān)?983)指出,55 d的培育獲得珊瑚型綠豆大的羊肚菌子實(shí)體原基,但最終未能獲得成熟的羊肚菌子實(shí)體。從全文來(lái)看,雖然作者也對(duì)獲得菌絲物進(jìn)行鏡檢,指出菌絲有分隔,無(wú)鎖狀聯(lián)合,但作者并未記錄菌絲的顏色變化、菌核等羊肚菌的其他典型特征,加之20℃的試管種和瓶栽培養(yǎng)時(shí)間均明顯長(zhǎng)于正常的羊肚菌生長(zhǎng)速度(編者注:PDA或CYM培養(yǎng)基,20 ~ 23℃培育,180×18 mm試管,平均4 ~ 6 d即可長(zhǎng)滿,6 ~ 9 d可形成菌核;750 mL原種瓶,20 ~ 23℃培育,20 ~ 25 d即可完全長(zhǎng)滿);且從培養(yǎng)基組成來(lái)看,作者使用的培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)均比較豐富,這不是菌絲生長(zhǎng)緩慢的原因所在,因此,這里我們無(wú)法對(duì)作者獲得的羊肚菌菌種純度進(jìn)行判別。作者進(jìn)行的瓶栽實(shí)驗(yàn)思路和常規(guī)的食用菌如金針菇、杏鮑菇等瓶栽相似,屬于早期的仿生栽培理念。雖然作者指出獲得珊瑚狀原基,但缺乏對(duì)其獲得的原基的詳細(xì)描述,也無(wú)法判定,其是否為真正的羊肚菌原基。(未完待續(xù))
劉偉授權(quán)易菇網(wǎng)獨(dú)家刊載,未經(jīng)許可,禁止轉(zhuǎn)載。
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