【作者】 汪虹; 陳明杰; 鮑大鵬;
【Author】 WANG Hong,CHEN Mingjie,BAO Dapeng National Engineering Research Center of Edible Fungi;Shanghai Key Laboratory of Agricultural Geneticsand Breeding;Institute of Edible Fungi,Shanghai Academy of Agricultural Sciences,Shanghai 201403,China
【機(jī)構(gòu)】 農(nóng)業(yè)部南方食用菌資源利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室國(guó)家食用菌工程技術(shù)研究中心上海市農(nóng)業(yè)遺傳育種重點(diǎn)開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所;
【摘要】 根據(jù)擔(dān)子菌絲/蘇氨酸蛋白激酶同源基因編碼的氨基酸序列設(shè)計(jì)兩對(duì)簡(jiǎn)并引物,通過(guò)巢式簡(jiǎn)并PCR方法獲得草菇(Volvariella volvacea)絲/蘇氨酸蛋白激酶同源基因(vv-stpk1)的保守片段,然后通過(guò)基因組步行的方法獲得了vv-stpk1全長(zhǎng)序列。vv-stpk1全長(zhǎng)為2 003 bp,含有8個(gè)內(nèi)含子,長(zhǎng)度分別為72、57、53、54、45、50、55和48 bp,可編碼522個(gè)氨基酸殘基的多肽。推定的氨基酸序列與玉米黑粉菌(Ustilagomaydis)、木糖發(fā)酵酵母(Pichia stipitis)、新型隱球菌(Cryptococcus neoformans)中與細(xì)胞形態(tài)發(fā)生相關(guān)的絲/蘇氨酸蛋白激酶Orb6的相似性分別為81%、77%和76%,對(duì)VV-STPK1蛋白的系統(tǒng)發(fā)生學(xué)分析的結(jié)果表明,VV-STPK1與Orb6同源蛋白聚在同一進(jìn)化枝上,這些數(shù)據(jù)都支持VV-STPK1蛋白為與細(xì)胞形態(tài)發(fā)生相關(guān)同源蛋白的推定。
【Abstract】 Two pairs of degenerate primers,designed according to the conserved amino acid sequences of several basidiomycete ser/thr protein kinases,were used in nested PCR to amplify the corresponding conserved DNA sequence from Volvariella volvacea.The complete DNA sequence of the ser/thr protein kinase(vv-stpk1) was then obtained by genome walking.vv-stpk1 was 2 003 bp in size,encoding for 522 amino acids,and contained eight introns.VV-STPK1 exhibited 81%,77% and 76% similarity with Orb6,a ser/thr prote...
【關(guān)鍵詞】 草菇; 絲/蘇氨酸蛋白激酶; 克??; 序列分析;
【Key words】 Volvariella volvacea; ser/thr protein kinase; gene clone; sequence analysis;
【基金】 上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院院發(fā)基金[編號(hào):上海農(nóng)科院農(nóng)科發(fā)2008(16)];上海市科委科技攻關(guān)重點(diǎn)項(xiàng)目(編號(hào):10DZ2212400)的部分研究?jī)?nèi)容
【分類號(hào)】S646.13