何麗鴻; 于榮利; 陳明杰; 潘迎捷
中華人民共和國農(nóng)業(yè)部應(yīng)用真菌資源與利用重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室; 上海市食用菌工程技術(shù)研究中心; 上海市農(nóng)業(yè)遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所; 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)院微生物系; 上海海洋大學(xué)

【中文摘要】 采用化學(xué)裂解和酶解相結(jié)合的方法,以加入PVPP的高鹽緩沖液作為細(xì)胞裂解反應(yīng)體系,用PEG- 8000進(jìn)行DNA沉淀.從雙孢蘑菇堆肥后發(fā)酵的4個(gè)代表時(shí)期培養(yǎng)料樣品中提取微生物總DNA,再以總DNA為模板,以專用引物F27和R1498進(jìn)行PCR擴(kuò)增,獲得16S rDNA片段,經(jīng)純化后構(gòu)建4個(gè)時(shí)期樣品的細(xì)菌16S rDNA文庫。試驗(yàn)結(jié)果表明,本試驗(yàn)獲得的總DNA質(zhì)量較好。采用PCR擴(kuò)增可獲得多個(gè)細(xì)菌、放線菌和真菌特異片段;細(xì)菌16S rDNA文庫的目的片段插入效率在90%以上。

【中文關(guān)鍵詞】 雙孢蘑菇; 培養(yǎng)料后發(fā)酵; 細(xì)菌16S rDNA文庫
【基金】農(nóng)業(yè)部公益性行業(yè)科研專項(xiàng)項(xiàng)目“食用菌菌種質(zhì)量評價(jià)與菌種信息系統(tǒng)研究與建立”(編號(hào)：nyhyzx07-008)的部分研究內(nèi)容

【文獻(xiàn)出處】 食用菌學(xué)報(bào),Acta Edulis Fungi,編輯部郵箱,2008年04期 【DOI】CNKI:SUN:SYJB.0.2008-04-005