稅丕容; 鄭曉冰; 林俊芳; 郭麗瓊
華南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院生物工程系; 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院生物工程系; 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院生物工程系; 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院生物工程系 廣東廣州510640; 廣東廣州510640; 廣東廣州510640; 廣東廣州510640
【中文摘要】 STE法是針對(duì)食用菌多糖含量高而設(shè)計(jì)的一種提取食用菌總RNA的有效方法。本研究以靈芝、香菇和白腐真菌TR16菌株的菌絲體為材料,采用STE法提取其總RNA,同時(shí)以Trizol法作對(duì)照。結(jié)果表明:采用STE法提取的三種菌絲的總RNAA260/A280比值在1.80~2.10范圍內(nèi),A260/A230略大于2.00;而Trizol法提取的總RNAA260/A280比值小于1.80,A260/A230小于1.90,明顯比STE法效果差;總RNA電泳檢測(cè)表明:STE法的3條帶(28SrRNA、18SrRNA和5SrRNA)清晰,無(wú)拖尾,無(wú)雜帶,效果比Trizol法好;將STE法提取的總RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄后合成雙鏈cDNA,進(jìn)行預(yù)擴(kuò)增,電泳顯示呈彌散狀;再進(jìn)行選擇性擴(kuò)增,有相同或相異的條帶。進(jìn)一步表明STE法提取的總RNA質(zhì)量較高,可以滿足后續(xù)分子生物學(xué)研究的要求。
【中文關(guān)鍵詞】 食用菌; 總RNA; STE法
【基金】國(guó)家自然科學(xué)基金(編號(hào):30671457,30371000);; 廣東省自然科學(xué)基金(編號(hào):5006680,032239)的部分研究?jī)?nèi)容
【文獻(xiàn)出處】 食用菌學(xué)報(bào),Acta Edulis Fungi,編輯部郵箱,2008年01期 【DOI】CNKI:SUN:SYJB.0.2008-01-009