林新堅(jiān); 江秀紅; 蔡海松; 鄭永標(biāo); 林陳強(qiáng)
福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所; 福建省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢驗(yàn)檢測(cè)中心; 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所; 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所; 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所 福州350013; 福州350003; 福州350013; 福州350013; 福州350013

【中文摘要】 為了建立穩(wěn)定的姬松茸(Agaricus blazei Murill)簡(jiǎn)單序列重復(fù)區(qū)間(Inter-Simple Sequence Repeats,ISSR)分子標(biāo)記技術(shù)體系,筆者通過(guò)單因子試驗(yàn)分別研究了模板DNA、Mg2+濃度、dNTP、引物濃度和Taq酶用量對(duì)姬松茸ISSR-PCR擴(kuò)增的影響,確定了姬松茸ISSR分析的最佳PCR條件為:25μL反應(yīng)體系中,模板DNA20ng,引物0.75μmol/L,dNTP200μmol/L,Mg2+2.0mmol/L,Taq DNA polymerase 1.5U。并應(yīng)用該優(yōu)化體系篩選到6個(gè)適合姬松茸ISSR-PCR擴(kuò)增的引物,為利用ISSR標(biāo)記技術(shù)研究姬松茸的種質(zhì)資源提供了參考。

【英文摘要】 Single factor testing was used to determine the optimal concentrations of DNA template,primer,dNTP,Mg2+ and Taq DNA polymerase for PCR amplification of inter-simple sequence repeats(ISSR)in order to establish a stable ISSR-based molecular marker system for Agaricus blazei Murrill.The reaction mixture for optimum amplification contained:20 ng DNA template,0.75 μmol/L primer,200 μmol/L dNTP,2.0 mmol/L Mg2+ and 1.5 U Taq DNA polymerase.Six primers suitable for PCR amplification of ISSR markers from A.blazei were selected using this system.Our data has important implications for A.blazei germplasm analysis.

【中文關(guān)鍵詞】 姬松茸; 簡(jiǎn)單序列重復(fù)區(qū)間; 體系優(yōu)化; 單因子試驗(yàn)
【英文關(guān)鍵詞】 Agaricus blazei; Inter-simple sequence repeats(ISSR); System optimization; Single factor test
【基金】福建省科技廳項(xiàng)目“姬松茸低鎘品種選育”(編號(hào)2002I010);; 福建省財(cái)政專項(xiàng)“福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)科技創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)建設(shè)基金”(STIF-Y01)的部分研究?jī)?nèi)容

【文獻(xiàn)出處】 食用菌學(xué)報(bào),Acta Edulis Fungi,編輯部郵箱,2007年04期 【DOI】CNKI:SUN:SYJB.0.2007-04-007