謝寶貴; 盧啟泉; 饒永斌; 孫淑靜; 鄭金貴
福建農(nóng)林大學(xué); 福建農(nóng)林大學(xué); 福建農(nóng)林大學(xué); 福建農(nóng)林大學(xué); 福建農(nóng)林大學(xué) 福州350002; 福州350002; 福州350002; 福州350002; 福州350002

【中文摘要】 用PCR法合成人胰島素基因,克隆到pUC18載體上,經(jīng)測(cè)序證實(shí)其堿基序列與人胰島素基因的序列完全一致。本實(shí)驗(yàn)還構(gòu)建了銀耳表達(dá)載體,由限制性內(nèi)切酶介導(dǎo)(Restriction enzy me-mediated DNA Integration,REMI)轉(zhuǎn)化銀耳芽孢。隨機(jī)挑取21個(gè)抗性菌落,轉(zhuǎn)管繁殖2代后檢測(cè)其GUS活性,實(shí)驗(yàn)結(jié)果:18個(gè)菌株陽性,3個(gè)菌株陰性。從這21個(gè)菌株中選取10個(gè)菌株,提取染色體DNA,用人胰島素基因、GUS基因和Tnos序列的特異引物進(jìn)行PCR,結(jié)果表明,這10菌株都能擴(kuò)增出相應(yīng)長(zhǎng)度的特異片段,證明了它們是人胰島素基因轉(zhuǎn)化子。

【中文關(guān)鍵詞】 人胰島素; 基因合成; 基因轉(zhuǎn)化; 銀耳; 芽孢
【基金】國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目“銀耳生物反應(yīng)器基礎(chǔ)研究”(No30471210);; 福建省衛(wèi)生教育聯(lián)合攻關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目“銀耳生物反應(yīng)器生產(chǎn)人胰島素的研究”(NoWKL2005-2-009)的部分研究?jī)?nèi)容

【文獻(xiàn)出處】 食用菌學(xué)報(bào),Acta Edulis Fungi,編輯部郵箱,2007年02期 【DOI】CNKI:SUN:SYJB.0.2007-02-000