付立忠; 魏海龍; 李海波; 吳慶其; 吳大豐; 吳學(xué)謙
浙江省林業(yè)科學(xué)研究院生物技術(shù)研究所; 浙江省林業(yè)科學(xué)研究院生物技術(shù)研究所; 浙江省林業(yè)科學(xué)研究院生物技術(shù)研究所; 浙江省林業(yè)科學(xué)研究院生物技術(shù)研究所; 麗水市食用菌研究開(kāi)發(fā)中心; 浙江省林業(yè)科學(xué)研究院生物技術(shù)研究所 杭州310023麗水市食用菌研究開(kāi)發(fā)中心; 浙江益圣菌物發(fā)展有限公司; 麗水323000; 杭州310023麗水市食用菌研究開(kāi)發(fā)中心; 浙江益圣菌物發(fā)展有限公司; 麗水323000; 杭州310023麗水市食用菌研究開(kāi)發(fā)中心; 浙江益圣菌物發(fā)展有限公司; 麗水323000; 杭州310023麗水市食用菌研究開(kāi)發(fā)中心; 浙江益圣菌物發(fā)展有限公司; 麗水323000; 浙江益圣菌物發(fā)展有限公司; 麗水323000; 杭州310023麗水市食用菌研究開(kāi)發(fā)中心; 浙江益圣菌物發(fā)展有限公司; 麗水323000
【中文摘要】 為了建立穩(wěn)定的香菇(Lentinula edodes)SRAP(sequence-related amplified polymorphis m,相關(guān)序列擴(kuò)增多態(tài)性)分子標(biāo)記技術(shù)體系,以香菇(Lentinula edodes)為材料,采用SDS-CTAB(sodium dodecyl sulfate-cetylri methylammoniumbromide)法提取菌絲體基因組DNA,用瓊脂糖檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物,篩選優(yōu)化了SRAP擴(kuò)增條件??捎糜谙愎絊RAP分析的最佳PCR條件為20μL PCR反應(yīng)體系中,模板DNA25ng,Buffer l×,Mg2+2.5mmol/L,dNTP Mixture0.2mmol/L,引物0.4μmol/L,Taq DNA聚合酶1.5U。優(yōu)化后的SRAP體系目標(biāo)條帶增多,重現(xiàn)性好。
【中文關(guān)鍵詞】 香菇; 分子標(biāo)記; 擴(kuò)增體系優(yōu)化; SRAP
【基金】浙江省重點(diǎn)攻關(guān)項(xiàng)目“香菇種質(zhì)資源保存利用與快速分類(lèi)鑒定關(guān)鍵技術(shù)研究”(編號(hào):2005C22057);; “生物技術(shù)在林木共生菌菌種快速分離鑒定上的應(yīng)用研究”(編號(hào):2004C22032);; 院所重大研發(fā)專(zhuān)項(xiàng)“森林食藥用真菌DNA指紋圖譜構(gòu)建及其應(yīng)用研究”(編號(hào):2006F11003)的部分研究?jī)?nèi)容
【文獻(xiàn)出處】 食用菌學(xué)報(bào),Acta Edulis Fungi,編輯部郵箱,2006年04期 【DOI】CNKI:SUN:SYJB.0.2006-04-002