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    一種基于細(xì)胞計(jì)數(shù)技術(shù)的羊肚菌單孢子菌種分離方法


    【發(fā)布日期】:2019-01-29  【來源】:中國食用菌
    【作者】鄒振平 王婷婷 袁通闊 樓瑩瑩 王一東
    【機(jī)構(gòu)】長春理工大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院
    摘要:為了獲取羊肚菌(Morchella esculenta)單孢子菌種,利用經(jīng)無菌處理的羊肚菌孢子懸液,經(jīng)細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后稀釋至每100微升含2個(gè)、1個(gè)、0.5個(gè)孢子,分別加入96孔細(xì)胞培養(yǎng)板培養(yǎng)孔中,鏡檢觀察各孔中的孢子數(shù)并標(biāo)記出含單個(gè)孢子的培養(yǎng)孔。室溫下培養(yǎng),待單孢子孔中孢子萌發(fā)的菌絲生長至培養(yǎng)孔底部邊緣時(shí),將菌絲轉(zhuǎn)移至PDA平板中培養(yǎng),對(duì)培養(yǎng)得到的菌絲進(jìn)行ELISA鑒定,確定分離得到羊肚菌單孢子菌種,然后將菌種進(jìn)行編號(hào),擴(kuò)大培養(yǎng)并保存。利用該方法分離得到3株羊肚菌單孢子菌種,分別編號(hào)為LG-01、LG-02、LG-03。
    基金:長春理工大學(xué)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目(2015S054; 2016S093); 吉林省教育廳“十三五”科學(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目(吉教科合字[2016]第384號(hào));
    關(guān)鍵詞:羊肚菌; 單孢子菌種; 細(xì)胞計(jì)數(shù); 酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA);
     
     
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