【作者】陶永新 段靜怡 李依寧 李自燕 宋寒冰 張祺鍶 黃嘉華 高玲玲 謝寶貴
【機(jī)構(gòu)】福建農(nóng)林大學(xué)園藝學(xué)院 福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院菌物研究中心
摘要:為了從分子水平探究提高金針菇賴氨酸含量的環(huán)境因子(溫度、光照、濕度、CO2)及其作用機(jī)理,本研究首先在金針菇(Flammulina filiformis)單核體L11基因組中鑒定L-賴氨酸合成通路基因,并預(yù)測其啟動子區(qū)順式元件。根據(jù)預(yù)測結(jié)果,采用紅、綠、藍(lán)、紅綠藍(lán)復(fù)合4種光處理金針菇子實(shí)體,并分別用HPLC和定量PCR測定賴氨酸含量變化及其合成通路基因的響應(yīng)表達(dá)。結(jié)果表明:金針菇賴氨酸由氨基己二酸(α-Aminoadipate,AAA)途徑合成,通路中8步催化酶的編碼基因及其序列在L11中全部得到鑒定。關(guān)鍵限速酶基因HCS、HAC1和SHD基因的啟動子區(qū)存在G-box等光照響應(yīng)元件。定量PCR表明,總體上看賴氨酸合成通路前7步的酶編碼基因?qū)?種光質(zhì)均有響應(yīng)表達(dá)。進(jìn)一步比較本試驗(yàn)中4種不同光質(zhì)的處理效果,發(fā)現(xiàn)藍(lán)光照射后的金針菇子實(shí)體中,共有7個(gè)賴氨酸合成通路基因(HCS、HAC1、HAH、HDH、AAT、AAR和SR)表達(dá)量上調(diào),同時(shí)賴氨酸含量最高。推測藍(lán)光可能通過激活賴氨酸合成通路基因啟動子區(qū)的G-box等順式元件,誘導(dǎo)通路基因上調(diào)表達(dá),進(jìn)而提高了金針菇子實(shí)體中賴氨酸含量。
基金:福建農(nóng)林大學(xué)園藝學(xué)院青年學(xué)術(shù)骨干培養(yǎng)基金(61201400706); 福建農(nóng)林大學(xué)科技創(chuàng)新專項(xiàng)基金(CXZX2017184); 國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(2014CB138302); 木生型食用菌品種選育與產(chǎn)業(yè)化工程項(xiàng)目(fjzycxny2017010); 福建省食用菌產(chǎn)業(yè)體系項(xiàng)目(K83139296);
關(guān)鍵詞:食用真菌; 賴氨酸生物合成; 光照處理; 順式作用元件;