【作者】劉建雨 張美彥 張丹 徐珍 宋春艷 李巧珍 尚曉冬 譚琦 黃志勇 胡衛(wèi)紅 張引芳 趙靜 王瑞娟

【機(jī)構(gòu)】上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所 農(nóng)業(yè)部應(yīng)用真菌資源與利用重點開放實驗室國家食用菌工程技術(shù)研究中心上海市農(nóng)業(yè)遺傳育種重點實驗室 上海雪榕生物科技股份有限公司 上海光明森源生物科技有限公司

摘要：以不完全酶解的金針菇(Flammulina velutipes)菌絲碎片作為轉(zhuǎn)化受體,通過電擊轉(zhuǎn)化法將載體pYN6981導(dǎo)入金針菇單核體Dan3基因組中。結(jié)果顯示:在復(fù)篩培養(yǎng)基上生長良好的轉(zhuǎn)化子,其基因組中可擴(kuò)增出潮霉素基因片段,通過激光共聚焦顯微鏡可觀察到綠色熒光,GUS組織染色顯示為藍(lán)色,說明目的載體已經(jīng)成功插入金針菇基因組中并獲得表達(dá)。轉(zhuǎn)化效率達(dá)16個轉(zhuǎn)化子每10~6個菌絲碎片。有絲分裂穩(wěn)定性分析顯示80%的轉(zhuǎn)化子可以穩(wěn)定遺傳。 

基金：上海市市級農(nóng)口系統(tǒng)青年人才成長計劃項目[滬農(nóng)青字(2017)第1-13號]； 上海市食用菌產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項資金[滬農(nóng)科產(chǎn)字(2017)第9號]；

關(guān)鍵詞：遺傳轉(zhuǎn)化; 綠色熒光蛋白; GUS組織染色;