【作者】曾鈺 熊亮 李潔 DENHAAN Riaan 趙心清 白鳳武

【機(jī)構(gòu)】上海交通大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院大連理工大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院Department of Biotechnology,University of Western Cape

摘要：異源蛋白質(zhì)分泌效率低限制了重組釀酒酵母的多種藥用蛋白和工業(yè)酶生產(chǎn)。挖掘促進(jìn)蛋白質(zhì)生物合成和分泌的關(guān)鍵基因,是提高異源蛋白質(zhì)生產(chǎn)效率的重要手段。釀酒酵母細(xì)胞壁完整性影響異源蛋白質(zhì)分泌,本研究利用基于CRISPR/Cas9的基因組編輯技術(shù),破壞了重組釀酒酵母Y294-BGL1中參與細(xì)胞壁合成的未知功能基因UTH1,發(fā)現(xiàn)所獲得的突變體胞外β-葡萄糖苷酶酶活比出發(fā)菌株提高112.9%,而細(xì)胞壁完整性下降。對(duì)促進(jìn)產(chǎn)酶的分子機(jī)理進(jìn)行探索,發(fā)現(xiàn)突變體產(chǎn)酶條件下與細(xì)胞壁完整性相關(guān)的關(guān)鍵基因和與蛋白質(zhì)分泌途徑相關(guān)的基因轉(zhuǎn)錄出現(xiàn)明顯差異,提示UTH1基因破壞不僅影響細(xì)胞壁完整性關(guān)鍵基因的表達(dá),也影響蛋白質(zhì)分泌途徑。本文的研究結(jié)果有助于深入理解UTH1的基因功能,并為構(gòu)建異源蛋白質(zhì)高分泌酵母菌株提供了借鑒。 

 

基金：國家自然科學(xué)基金(31461143029； 51561145014)~~；

 

關(guān)鍵詞：纖維素酶; 釀酒酵母; β-葡萄糖苷酶; UTH1基因; 細(xì)胞壁完整性;