【作者】張佳 李多川
【機(jī)構(gòu)】山東農(nóng)業(yè)大學(xué)菌物學(xué)系
摘要:疏綿狀嗜熱絲孢菌Thermomyces lanuginosus是一種廣泛分布的嗜熱真菌,產(chǎn)生的酶在高溫條件下具有高活性和穩(wěn)定性。從該嗜熱真菌中克隆了一種錳超氧化物歧化酶(manganese superoxide dismutase,MnSOD)基因Tlmnsod1(EU364837),cDNA全長(zhǎng)791bp,開放閱讀框654bp,編碼217個(gè)氨基酸,沒有信號(hào)肽和前導(dǎo)肽序列。Tlmnsod1基因在酵母中高效表達(dá),經(jīng)純化獲得了電泳均一分子量約為27kDa的重組蛋白TlMnSOD1。表達(dá)的TlMnSOD1酶是糖基化蛋白,具高的熱穩(wěn)定性,最適反應(yīng)pH和溫度分別為8.0和55℃。通過對(duì)真菌的40種錳超氧化物歧化酶的細(xì)胞定位和系統(tǒng)學(xué)分析可知:真菌的錳超氧化物歧化酶可以分為胞內(nèi)MnSOD、線粒體MnSOD和胞外MnSOD;錳超氧化物歧化酶可以作為分子標(biāo)記來研究真菌的進(jìn)化關(guān)系;3種嗜熱真菌MnSOD分別與非嗜熱真菌MnSOD聚類在3個(gè)不同的組中。本研究為MnSOD的糖基化和作為分子標(biāo)記用于真菌種的鑒定提供了證據(jù)。
基金:Supported by the Chinese National Key Technology Support Program(2015BAD15B05); the National Natural Science Foundation of China(31571949); National High-Technology Research&Development Program of China(2012AA10180402);
關(guān)鍵詞:疏綿狀嗜熱絲孢菌; 糖基化錳超氧化物歧化酶; 熱穩(wěn)定性; 系統(tǒng)學(xué); 分子標(biāo)記;