【作者】馬超君 王剛正 周莎莎 羅義 龔鈺華 邊銀丙

【機(jī)構(gòu)】華中農(nóng)業(yè)大學(xué)植物科學(xué)技術(shù)學(xué)院應(yīng)用真菌研究所

摘要：鄰氨基苯甲酸合酶(Trp E)是生物體內(nèi)一種重要的逆境誘導(dǎo)蛋白,其在逆境條件下的響應(yīng)保證了生物體生存相關(guān)產(chǎn)物的正常代謝。本文以香菇Lentinula edodes栽培菌株S606為試驗(yàn)材料,以Le Trp E功能結(jié)構(gòu)保守區(qū)域395bp的反向互補(bǔ)片段為干擾片段,構(gòu)建Letrp E基因雙向啟動(dòng)子RNAi載體;采用根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法侵染香菇菌絲,通過PCR方法檢測(cè)DNA插入片段,獲得11個(gè)陽性轉(zhuǎn)化子;實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析結(jié)果表明,2個(gè)轉(zhuǎn)化子Letrp E基因表達(dá)量較野生型菌株下調(diào)了2–3倍,確認(rèn)其為L(zhǎng)etrp E基因RNAi轉(zhuǎn)化子;菌絲體在40℃高溫處理24h后,檢查到吲哚-3-乙酸合成途徑中基因Le Tam-1在野生菌株S606表達(dá)量上調(diào),而在2個(gè)RNAi轉(zhuǎn)化子中表達(dá)量下調(diào);RNAi轉(zhuǎn)化子菌絲體在25℃下不能恢復(fù)生長(zhǎng),而野生型菌絲體可以恢復(fù)生長(zhǎng)。研究表明,香菇Letrp E基因的功能與耐熱性有關(guān)。 

 

基金：國(guó)家自然科學(xué)基金(34116162)； 湖北省技術(shù)創(chuàng)新專項(xiàng)重大項(xiàng)目(2016ABA100)~~；

 

關(guān)鍵詞：香菇; 高溫脅迫; 耐熱性; 鄰氨基苯甲酸合酶; 轉(zhuǎn)化子;