【作者】劉鑫 侯若琳 金珊珊 戚夢 胡開輝 鄭明鋒 傅俊生
【機構(gòu)】福建農(nóng)林大學食品科學學院福建古田縣食用菌研發(fā)中心福建農(nóng)林大學(古田)菌業(yè)研究院福建農(nóng)林大學生命科學學院
摘要:從分子水平上探究粗毛纖孔菌與桑黃孔菌屬菌株的差異,同時以人乳腺癌MDA-MB-231細胞篩選粗毛纖孔菌深層發(fā)酵液抗乳腺癌活性部位,并對其成分進行初步分析。基于r DNA ITS序列分子系統(tǒng)發(fā)育樹和拆分網(wǎng)絡(splits network)分析研究粗毛纖孔菌與桑黃孔菌屬菌株的差異;采用MTT法檢測發(fā)酵液不同提取物抗乳腺癌活性;通過細胞形態(tài)觀察進一步了解活性提取物對細胞生長的影響;采用LC-MS/MS對活性提取物的成分進行分析。系統(tǒng)發(fā)育樹表明粗毛纖孔菌與桑黃孔菌屬菌株存在一定的遺傳差異,粗毛纖孔菌GC含量較桑黃孔菌屬菌株低,同時拆分網(wǎng)絡分析法能更好地區(qū)分粗毛纖孔菌與桑黃;粗毛纖孔菌深層發(fā)酵液正丁醇提取物對MDA-MB-231細胞生長的抑制作用最強且呈量效和時效關(guān)系(P<0.05),作用24h的IC50值為245.44μg/mL;細胞形態(tài)觀察顯示正丁醇提取物濃度在250μg/mL時,對MDA-MB-231細胞的凋亡作用隨著時間的延長而加強;LC-MS/MS檢測到正丁醇萃取部分的物質(zhì)有2個,這2個物質(zhì)均首次在粗毛纖孔菌中鑒定得到。結(jié)果表明,拆分網(wǎng)絡分析法可較好地用于粗毛纖孔菌與桑黃孔菌屬菌株的分子甄別,正丁醇提取物是粗毛纖孔菌深層發(fā)酵液抗乳腺癌MDA-MB-231細胞的主要活性部位,為進一步開發(fā)利用粗毛纖孔菌藥用資源提供科學依據(jù)。
基金:國家自然科學基金(81503187); 福建省中青年教師教育科研項目(JA15177); 福建農(nóng)林大學現(xiàn)代種業(yè)工程研究院建設經(jīng)費; 福建省重大農(nóng)技推廣服務試點項目(KNJ-153011-4); 福建省食用菌產(chǎn)業(yè)技術(shù)重大研發(fā)平臺(2014N2001)~~;
關(guān)鍵詞:粗毛纖孔菌; 桑黃孔菌屬; 深層發(fā)酵液; 乳腺癌; liquid chromatograph-mass spectrometer(LC-MS/MS);