【作者】秦澎辜運富曾先富向泉桔

【機(jī)構(gòu)】四川農(nóng)業(yè)大學(xué)資源學(xué)院微生物系成都市農(nóng)林科學(xué)院園藝研究所

摘要：漆酶是一種含銅的多酚氧化酶,其作用底物范圍廣,在食品、能源和環(huán)保等領(lǐng)域具有重要的應(yīng)用價值,因此篩選高產(chǎn)漆酶菌株對于其工業(yè)應(yīng)用具有重要意義。本實驗以78株香菇菌株為實驗材料,利用愈創(chuàng)木酚平板法初篩,液體發(fā)酵復(fù)篩的方法篩選高產(chǎn)漆酶香菇菌株,并通過實時定量PCR分析香菇漆酶同工酶在不同菌株之間轉(zhuǎn)錄表達(dá)的差異性和特異性。結(jié)果表明,不同香菇菌株的生長速度、變色圈大小存在差異,以菌絲圈和變色圈大小及其比例為依據(jù),從78株香菇菌株中篩選出19株潛在的漆酶高產(chǎn)菌株;液體發(fā)酵從這19株菌株中復(fù)篩出3株高產(chǎn)漆酶的菌株:香240、15和冕寧淺灰,其中香240在培養(yǎng)第3天酶活達(dá)到最高(3.583U/m L),香15和冕寧淺灰則在培養(yǎng)第7天酶活達(dá)到最高(分別為3.842U/m L和2.806U/m L);實時熒光定量PCR結(jié)果顯示,10個漆酶同工酶基因在兩株香菇菌株中的表達(dá)存在差異性和特異性,其中Lelac5和Lelac9只在菌株香240中檢測到轉(zhuǎn)錄本;Lelac1–4在菌株15中表達(dá)量較高,而Lelac8、Lelac10和Lelac11在香240中的表達(dá)量較高。研究結(jié)果將為香菇漆酶的進(jìn)一步研究提供基礎(chǔ)。 

 

基金：四川省教育廳重點項目(15ZA0013)； 四川省科技支撐計劃項目； 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)科研興趣培養(yǎng)計劃(20150316)~~；

 

關(guān)鍵詞：平板篩選; 同工酶; 實時熒光定量PCR; 表達(dá)量;