【作者】蘇豫陳依軍車永勝劉鋼

【機構(gòu)】中國藥科大學(xué)化學(xué)生物學(xué)研究室軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院毒物藥物研究所抗毒藥物與毒理學(xué)國家重點實驗室中國科學(xué)院微生物研究所真菌學(xué)國家重點實驗室

【摘要】己糖激酶在真菌中廣泛存在,參與葡萄糖磷酸化等生理過程。本文從頭孢菌素產(chǎn)生菌頂頭孢霉中克隆并鑒定了一個己糖激酶編碼基因,命名為Achka。通過RT‐PCR證明Achka含有4個內(nèi)含子,其推測的編碼蛋白含有484個氨基酸,分子量為53.7k Da。在頂頭孢霉中敲除Achka后發(fā)現(xiàn),突變株在以果糖、蔗糖或甘露糖為唯一碳源的培養(yǎng)基上生長受到嚴(yán)重限制。我們在大腸桿菌中異源表達(dá)了Achka,并對表達(dá)的重組蛋白AcHKA進(jìn)行了分離純化。酶學(xué)動力學(xué)分析表明,AcHKA對果糖的最大反應(yīng)速率要大于葡萄糖,但是卻對葡萄糖有更高的親和力。上述結(jié)果進(jìn)一步證明AcHKA為己糖激酶,在頂頭孢霉體內(nèi)主要負(fù)責(zé)果糖、蔗糖和甘露糖等的代謝。 

【基金】國家自然科學(xué)基金(31470177)~~；

【關(guān)鍵詞】頂頭孢霉; 己糖激酶; Achka; 己糖利用;