【作者】陳銘 耿志剛 劉寧 李多川
【機(jī)構(gòu)】山東農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院菌物學(xué)系
摘要：多糖單加氧酶(Polysaccharide monooxygenases,PMOs)是一類含銅氧化酶,在還原型輔因子(如維生素C)存在下可使纖維素分子氧化降解,在纖維素的酶解中起重要作用。本研究克隆5個(gè)嗜熱真菌PMOs基因,構(gòu)建p PICZαA-PMO表達(dá)載體,電轉(zhuǎn)畢赤酵母GS115進(jìn)行真核表達(dá),經(jīng)鎳柱純化獲得重組蛋白后對(duì)其氧化活性進(jìn)行探究。用5個(gè)PMOs分別處理磷酸膨脹纖維素(PASC),薄層層析法(TLC)鑒定酶解產(chǎn)物主要為纖維二糖到纖維六糖;飛行時(shí)間質(zhì)譜法(MALDI-TOF-MS)鑒定結(jié)果顯示:PMO0810為C4或C6氧化,PMO2033、PMO0154、PMO4983既有C1氧化也有C4或C6氧化,PMO3424未檢測(cè)到相應(yīng)的氧化裂解峰。
基金：國(guó)家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(2012AA10180402)； 國(guó)家科技支撐計(jì)劃(2015BAD15B05)； 國(guó)家自然科學(xué)基金(31571949)~~；
關(guān)鍵詞：多糖單加氧酶; 嗜熱真菌; 氧化裂解; 飛行時(shí)間質(zhì)譜;