【作者】張琪 程顯好 郭文娟 劉鳳紅 王朝霞
【機構(gòu)】魯東大學菌物科學與技術(shù)研究院天津工業(yè)大學環(huán)境與化工學院
【摘要】研究探討鋅離子脅迫下蛹蟲草Cordyceps militaris金屬硫蛋白的產(chǎn)生及性質(zhì)。蛹蟲草菌絲體以15g/L Zn2+在10L發(fā)酵罐中誘導培養(yǎng)56h后收集,產(chǎn)率為每升發(fā)酵液收集12.021g菌絲體(干重),細胞破碎取上清液通過兩次凝膠柱層析,冷凍干燥得到蛹蟲草金屬硫蛋白純品。利用Bradford法進行蛋白質(zhì)含量測定,用銀飽和分析法結(jié)合原子吸收光譜(AAS)測定MT含量,發(fā)酵終點處金屬硫蛋白含量為12.876mg/g菌絲體(濕重)。用電噴霧質(zhì)譜法測得金屬硫蛋白的分子量為7 390Da,用Ellman’s方法和火焰原子吸收法分別測得每分子蛋白質(zhì)含有14個巰基、結(jié)合5個Zn原子。氨基酸組成分析結(jié)果顯示,每分子蛋白質(zhì)共含57個氨基酸,其中含有13個半胱氨酸,疏水氨基酸占29.8%,且含有組氨酸。以上表明,研究中的蛹蟲草金屬硫蛋白與哺乳動物金屬硫蛋白結(jié)構(gòu)差異較大,但與酵母菌金屬硫蛋白結(jié)構(gòu)組成類似。
【基金】山東省自然科學基金聯(lián)合專項(No.ZR2010CL005); 煙臺市科技發(fā)展計劃項目(No.2011069);
【關(guān)鍵詞】蛹蟲草; 金屬硫蛋白; 鋅誘導; 氨基酸組成;