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    草菇葡萄糖‐6‐磷酸脫氫酶基因及其可變剪接體的克隆與表達量分析


    【發(fā)布日期】:2019-01-22  【來源】:菌物學(xué)報
    【作者】陶永新 張磊 郭麗 陳仁良 連玲丹 謝寶貴
    【機構(gòu)】福建農(nóng)林大學(xué)園藝學(xué)院 福建農(nóng)林大學(xué)菌物研究中心
    摘要:葡萄糖-6-磷酸脫氫酶是戊糖磷酸途徑的限速酶,影響著細胞生命活動所需要的NADPH的產(chǎn)生。本研究從草菇中克隆到該基因的2個轉(zhuǎn)錄本,并測定了它們在兩個同核體和形成的異核體菌株中的表達量。結(jié)果表明,草菇葡萄糖-6-磷酸脫氫酶基因(g6pdh)的g DNA序列長1 954bp,有7個內(nèi)含子,可產(chǎn)生兩個轉(zhuǎn)錄本:一個是內(nèi)含子全部剪切的轉(zhuǎn)錄本(g6pdh ID),編碼515個氨基酸且有完整結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì);另一個是第5個內(nèi)含子保留的可變剪接變體(g6pdh IR),預(yù)測編碼316個氨基酸但沒有完整結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)。定量PCR結(jié)果顯示,可變剪接變體g6pdh IR在草菇同核體與異核體中的表達量均很低,因此轉(zhuǎn)錄本g6pdh ID為g6pdh基因的主要剪接體;并且g6pdh基因在生長旺盛的異核體中的表達量遠遠高于在生長較弱的兩個同核體中的任何一個。研究結(jié)論說明,糖代謝活動的強弱與食用真菌的生長與發(fā)育有密切關(guān)系。
    基金:國家重點基礎(chǔ)研究發(fā)展計劃(2014CB138302); 國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項資金(CARS24); 福建農(nóng)林大學(xué)優(yōu)秀博士學(xué)位論文資助基金(YB2013007);
    關(guān)鍵詞:食用真菌; 戊糖磷酸途徑; 基因克隆; 定量PCR;
     
     
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