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    利用cDNA-AFLP技術(shù)分離當(dāng)歸間座殼菌誘導(dǎo)的野生車前草差異表達(dá)基因


    【發(fā)布日期】:2019-01-21  【來源】:菌物學(xué)報(bào)
    【作者】崔朝宇 劉喬麗 蔣軍喜 劉登全 劉冰 馬建
    【機(jī)構(gòu)】江西農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院
    【摘要】以高抗穗枯病野生車前草種質(zhì)PPZ14為材料,用引起車前草穗枯病的當(dāng)歸間座殼菌Diaporthe angelicae強(qiáng)致病力真菌菌株DA‐8對(duì)其接種,采用cDNA‐AFLP技術(shù)分離接種后不同時(shí)間點(diǎn)產(chǎn)生的差異表達(dá)基因片段。結(jié)果從64對(duì)引物組合中篩選到4對(duì)多態(tài)性豐富的引物組合,并用其進(jìn)行擴(kuò)增得到202條差異表達(dá)的轉(zhuǎn)錄衍生片段(transcript‐derived fragment,TDF),其中以接種24h后出現(xiàn)的TDF數(shù)量最多,表明在此時(shí)間點(diǎn)車前草與當(dāng)歸間座殼菌互作最活躍。對(duì)部分TDF進(jìn)行克隆及序列測(cè)定,共獲得7個(gè)TDF的核苷酸序列和推導(dǎo)的氨基酸序列,經(jīng)BLAST比對(duì),5個(gè)TDF的氨基酸序列在GenBank中找到與其對(duì)應(yīng)的顯著同源序列,其中4個(gè)為已知功能的基因,對(duì)其進(jìn)行功能分析后,推測(cè)認(rèn)為,決定ACC氧化酶、細(xì)胞色素C生成蛋白C、液泡膜H+‐ATPase的TDF與車前草抗穗枯病性相關(guān)。 
    【基金】國(guó)家自然科學(xué)基金“穗枯病菌誘導(dǎo)的野生車前草抗性相關(guān)基因克隆及功能分析”(No.30960213);
    【關(guān)鍵詞】車前草; 當(dāng)歸間座殼菌; cDNA‐AFLP; 差異表達(dá)基因;
     
     
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