【作者】張國(guó)慶 王有志 王守現(xiàn) 王賀祥 陳青君
【機(jī)構(gòu)】北京農(nóng)學(xué)院農(nóng)業(yè)部都市農(nóng)業(yè)(北方)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)生物學(xué)院農(nóng)業(yè)生物技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 中國(guó)科學(xué)院微生物研究所菌種保藏中心 北京市農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)環(huán)境保護(hù)研究所
摘要：樹狀多節(jié)孢Nodulisporium sylviforme是從東北紅豆杉Taxus cuspidata分離、可產(chǎn)生紫杉醇的內(nèi)生真菌。研究以樹狀多節(jié)孢為材料,利用液體發(fā)酵手段獲得菌絲體,通過(guò)CM-cellulose陰離子交換柱層析、Q-Sepharose陽(yáng)離子交換柱層析和FPLC凝膠過(guò)濾層析(Superdex 75),獲得純化的樹狀多節(jié)孢酸性磷酸酶蛋白(Nod-ACP)。結(jié)合FPLC和SDS-PAGE分析,判定該磷酸酶為分子量44kDa單亞基蛋白。酶學(xué)性質(zhì)研究表明,其最適pH值為3.0,最適溫度為58℃。6.25-50mmol/L的Ca2+、Mn2+、Mg2+和Zn2+對(duì)酶活有30%-50%的促進(jìn)作用,而Cu2+、Al3+和Fe3+對(duì)酶活有顯著的抑制作用;當(dāng)Fe2+濃度低于25mmol/L時(shí)表現(xiàn)為促進(jìn)作用,但濃度達(dá)到50mmol/L時(shí)磷酸酶完全失活。
基金：北京市科委項(xiàng)目(No.Z101105002510003)； 北京市屬高等學(xué)校人才強(qiáng)教項(xiàng)目(No.PHR200907136)；
關(guān)鍵詞：樹狀多節(jié)孢; 酸性磷酸酶; 性質(zhì); 酶活性;