【作者】范美霞 付燦 孫迅 陶宗婭
【機(jī)構(gòu)】菏澤學(xué)院生命科學(xué)系 四川師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院
摘要:以麥草粉為基質(zhì)培養(yǎng)粗毛栓菌Trametes gallica,浸提固態(tài)培養(yǎng)物得浸提液,后經(jīng)超濾濃縮、硫酸銨鹽析、Phenyl-Sepharose CL-4B疏水層析、DEAE Sepharose fast flow陰離子交換層析和Sephadex G-150分子篩層析等分離與純化步驟,獲得部分純化的木聚糖酶,其回收率和純化倍數(shù)分別為1.45%和15.6。進(jìn)一步經(jīng)活性-PAGE回收,獲得三種SDS-PAGE電泳純級(jí)的木聚糖酶同工酶組分:XⅠ、XⅡ和XⅢ(按等電點(diǎn)從大到小排列)。三種組分分子量均約為19.0kDa;等電點(diǎn)分別為:5.6、4.7和4.0;含糖量分別為:0.25%、0.63%和3.4%;XⅠ既能降解木聚糖,又能降解纖維素;XⅡ的最適作用pH值為5.0,最適作用溫度45℃;Mg2+、Fe2+對(duì)XⅡ有激活作用;Mn2+和Co2+有抑制作用;測得XⅡ的Km值為0.75mg/mL,Vmax為5,000mmoL/min·mg。
關(guān)鍵詞:白腐菌; 同工酶; 分離純化; 酶學(xué)性質(zhì);
【機(jī)構(gòu)】菏澤學(xué)院生命科學(xué)系 四川師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院
摘要:以麥草粉為基質(zhì)培養(yǎng)粗毛栓菌Trametes gallica,浸提固態(tài)培養(yǎng)物得浸提液,后經(jīng)超濾濃縮、硫酸銨鹽析、Phenyl-Sepharose CL-4B疏水層析、DEAE Sepharose fast flow陰離子交換層析和Sephadex G-150分子篩層析等分離與純化步驟,獲得部分純化的木聚糖酶,其回收率和純化倍數(shù)分別為1.45%和15.6。進(jìn)一步經(jīng)活性-PAGE回收,獲得三種SDS-PAGE電泳純級(jí)的木聚糖酶同工酶組分:XⅠ、XⅡ和XⅢ(按等電點(diǎn)從大到小排列)。三種組分分子量均約為19.0kDa;等電點(diǎn)分別為:5.6、4.7和4.0;含糖量分別為:0.25%、0.63%和3.4%;XⅠ既能降解木聚糖,又能降解纖維素;XⅡ的最適作用pH值為5.0,最適作用溫度45℃;Mg2+、Fe2+對(duì)XⅡ有激活作用;Mn2+和Co2+有抑制作用;測得XⅡ的Km值為0.75mg/mL,Vmax為5,000mmoL/min·mg。
關(guān)鍵詞:白腐菌; 同工酶; 分離純化; 酶學(xué)性質(zhì);