【作者】喬娜 汪虹 陳明杰
【機(jī)構(gòu)】南京農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 農(nóng)業(yè)部應(yīng)用真菌資源與利用重點開放實驗室 上海市食用菌工程技術(shù)研究中心 上海市農(nóng)業(yè)遺傳育種重點實驗室 上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所
【摘要】將草菇菌株V23和耐低溫誘變草菇菌株VH3的菌絲在4℃下處理不同時間,分別提取RNA,反轉(zhuǎn)錄獲得cDNA作為模板,構(gòu)建含Cor1基因和GPD內(nèi)標(biāo)基因片段的質(zhì)粒作為標(biāo)準(zhǔn)品,采用熒光定量PCR技術(shù)研究Cor1基因在低溫下的表達(dá)變化。結(jié)果表明草菇V23菌株的Cor1基因未經(jīng)低溫處理的表達(dá)量最大,低溫處理后表達(dá)量持續(xù)下降,在6h達(dá)到最低值,8h開始該基因的表達(dá)量上升;而VH3菌株Cor1基因低溫處理后表達(dá)量明顯增加,2h達(dá)到最大值,4h下降,但6h開始上升,10h又下降。通過推測Cor1基因表達(dá)與草菇耐低溫特性有相關(guān)性,為今后利用草菇自身的抗寒機(jī)制進(jìn)行遺傳改造提供理論依據(jù)。
【基金】上海農(nóng)科院2006年度青年科學(xué)基金“利用實時熒光定量PCR技術(shù)驗證草菇冷誘導(dǎo)基因的表達(dá)”； 上海市科技興農(nóng)重點攻關(guān)項目“草菇低溫誘變菌株VH3配套栽培技術(shù)的研究”(滬農(nóng)科攻字2007第6-2號)； 農(nóng)業(yè)部公益性行業(yè)科研專項項目(食用菌現(xiàn)代產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系研究與建立)(No.nyhyzx07-008)；
【關(guān)鍵詞】食用菌; 耐低溫誘變菌株; 雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法; 定量PCR;