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    根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的輪枝鐮孢菌遺傳轉(zhuǎn)化及T-DNA插入突變體的篩選


    【發(fā)布日期】:2018-10-06  【來(lái)源】:菌物學(xué)報(bào)
    【作者】趙培寶 周慶新 任愛(ài)芝 李多川
    【機(jī)構(gòu)】山東農(nóng)業(yè)大學(xué)植物病理系聊城大學(xué)植物保護(hù)系山東農(nóng)業(yè)大學(xué)植物病理系 泰安271018 聊城大學(xué)植物保護(hù)系聊城252000
    【摘要】建立并優(yōu)化了農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化輪枝鐮孢菌Fusarium verticillioides獲得T-DNA插入突變體的體系,在鐮孢菌孢子濃度106個(gè)/mL、農(nóng)桿菌OD600=0.15-0.20、乙酰丁香酮濃度為200μmol/mL的條件下共培養(yǎng)36h轉(zhuǎn)化率最高,可達(dá)60-120個(gè)/106個(gè)孢子。共獲得轉(zhuǎn)化子1000多個(gè),連續(xù)轉(zhuǎn)接5代能夠穩(wěn)定遺傳。PCR驗(yàn)證潮霉素B抗性基因已整合進(jìn)轉(zhuǎn)化子基因組DNA中,部分轉(zhuǎn)化子表現(xiàn)為生長(zhǎng)和形態(tài)異常。該轉(zhuǎn)化體系的建立為研究該菌的致病機(jī)制和功能基因分析奠定了基礎(chǔ)。   
    【基金】國(guó)家自然科學(xué)基金資助(No.30571246);
    【關(guān)鍵詞】載體; 轉(zhuǎn)化率; 轉(zhuǎn)化子; 遺傳轉(zhuǎn)化;
     
     
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