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    SEFA-PCR法克隆靈芝鯊烯合酶基因啟動(dòng)子及其序列分析


    【發(fā)布日期】:2018-06-19  【來源】:菌物學(xué)報(bào)
    【作者】李娜 王世明 陳軍 李玉祥 趙明文
    【機(jī)構(gòu)】南京農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院農(nóng)業(yè)部農(nóng)業(yè)環(huán)境微生物工程重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室南京農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院農(nóng)業(yè)部農(nóng)業(yè)環(huán)境微生物工程重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室 南京210095
    【摘要】鯊烯合酶是靈芝三萜生物合成的關(guān)鍵酶,靈芝鯊烯合酶基因的表達(dá)和活性的高低決定了靈芝中三萜含量的高低。根據(jù)已經(jīng)獲得的靈芝鯊烯合酶全長cDNA序列設(shè)計(jì)一對專一引物,通過PCR擴(kuò)增得到了靈芝鯊烯合酶基因的基因組全長,序列長1984bp,含有3個(gè)內(nèi)含子。根據(jù)其基因組序列設(shè)計(jì)引物,采用SEFA-PCR的方法,以總DNA為模板,克隆了靈芝鯊烯合酶基因的啟動(dòng)子序列,長1042bp。序列分析發(fā)現(xiàn)靈芝鯊烯合酶基因啟動(dòng)子中沒有明顯的TATA和CAAT框,但是含有CCAAT-bindingfactor、GATA-1、GC-box、TFⅡD等重要的轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合位點(diǎn),以及在人和釀酒酵母鯊烯合酶基因啟動(dòng)子中發(fā)現(xiàn)的甾醇調(diào)節(jié)相關(guān)的順式調(diào)控元件。 
    【基金】國家自然科學(xué)基金(30300006,30571294); 江蘇省自然科學(xué)基金創(chuàng)新人才項(xiàng)目(BK2006517)資助;
    【關(guān)鍵詞】靈芝三萜; 生物合成; 轉(zhuǎn)錄調(diào)控;
     
     
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