【作者】任志紅 徐平 王富強(qiáng) 蘇彩云 豐玫玫 張佳 戴夢(mèng) 韋春玲 穆岷 賀建功
載體結(jié)構(gòu)圖
【機(jī)構(gòu)】華北制藥集團(tuán)新藥研究開發(fā)有限責(zé)任公司 華北制藥集團(tuán)新藥研究開發(fā)有限責(zé)任公司 石家莊050015
【摘要】本研究以四種不同物種來源,不同代謝途徑功能基因的啟動(dòng)子為材料,分別構(gòu)建了以產(chǎn)黃青霉異青霉素N合成酶(IPNS)基因pcbC的啟動(dòng)子Pipns、構(gòu)巢曲霉3-磷酸甘油醛脫氫酶基因gpdA的啟動(dòng)子PgpdA、構(gòu)巢曲霉色氨酸合成基因trpC的啟動(dòng)子PtrpC、粗糙脈胞霉氨基酸合成交叉途徑控制基因cpc的啟動(dòng)子Pcpc為啟動(dòng)子,腐草霉素(phleomycin)抗性基因?yàn)閳?bào)告基因,構(gòu)巢曲霉色氨酸合成基因trpC的終止子TtrpC為終止信號(hào)的絲狀真菌轉(zhuǎn)基因質(zhì)粒,建立了產(chǎn)黃青霉工業(yè)生產(chǎn)菌種啟動(dòng)子篩選、評(píng)價(jià)體系,調(diào)查了這四種啟動(dòng)子的強(qiáng)弱。結(jié)果表明選擇性標(biāo)記基因受強(qiáng)啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)可以提高產(chǎn)黃青霉工業(yè)生產(chǎn)菌種的轉(zhuǎn)基因效率。研究也顯示這四種啟動(dòng)子的強(qiáng)弱的順序?yàn)镻gpdA、Pcpc、Pipns和PtrpC。
【基金】國家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863計(jì)劃)(2003AA001005); 國家科技攻關(guān)計(jì)劃(2002BA711A16); 國家技術(shù)創(chuàng)新項(xiàng)目計(jì)劃資金資助;
【關(guān)鍵詞】調(diào)控元件; 抗性基因; 轉(zhuǎn)化效率;
載體結(jié)構(gòu)圖
產(chǎn)黃青霉菌轉(zhuǎn)化子 PCR 分析 (引物 ph1 和 ph2 擴(kuò)增結(jié)果)