【作者】張永軍方衛(wèi)國(guó)金凱羅志兵周永洪肖月華裴炎

【機(jī)構(gòu)】農(nóng)業(yè)部生物技術(shù)與作物品質(zhì)改良重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室重慶市農(nóng)業(yè)生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室西南農(nóng)業(yè)大學(xué)生物技術(shù)中心農(nóng)業(yè)部生物技術(shù)與作物品質(zhì)改良重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室重慶市農(nóng)業(yè)生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室西南農(nóng)業(yè)大學(xué)生物技術(shù)中心 重慶400716

【摘要】根據(jù)幾種絲狀真菌FUS3/KSS1類MAPK的保守序列設(shè)計(jì)簡(jiǎn)并引物,從昆蟲病原真菌球孢白僵菌中擴(kuò)增出MAPK基因的部分片段,進(jìn)而利用YADE法延伸該片段的上、下游鄰接序列,獲得MAPK基因的全長(zhǎng)序列,命名為BbMPK1。用3′RACE擴(kuò)增出BbMPK1的全長(zhǎng)cDNA序列,該序列含有一個(gè)1071bp的ORF,編碼356個(gè)氨基酸的多肽,推測(cè)分子量為41.2kDa,等電點(diǎn)為6.61。BbMPK1含有11個(gè)MAPK共有的蛋白激酶區(qū)域和1個(gè)MAPK激酶作用的磷酸化位點(diǎn)區(qū)域(TEY),其氨基酸序列與絲狀真菌的TMKA、PMK1、CMK1、FMK1和BMP1等MAPK高度同源。系統(tǒng)聚類結(jié)果表明,BbMPK1屬于酵母FUS3/KSS1類MAPK。Southern雜交表明,BbMPK1在球孢白僵菌基因組中以單拷貝形式存在。RT-PCR分析表明BbMPK1在分生孢子休眠階段、萌發(fā)階段和菌絲生長(zhǎng)時(shí)期均表達(dá)。研究結(jié)果為闡明酵母FUS3/KSS1類MAPK同源基因在球孢白僵菌中的作用奠定了基礎(chǔ)。

【基金】國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究計(jì)劃(973)項(xiàng)目(2003CB114203)； 國(guó)家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863)項(xiàng)目(2002AA214051)； 重慶市教委項(xiàng)目(20204)；

【關(guān)鍵詞】信號(hào)傳導(dǎo); 致病性; 昆蟲病原真菌;