【作者】王龍 莊文穎

【機構(gòu)】中國科學院微生物研究所真菌地衣系統(tǒng)學重點實驗室,中國科學院微生物研究所真菌地衣系統(tǒng)學重點實驗室 北京100080中國科學院研究生院,北京100080

【摘要】在本研究中,基于某些模型生物的鈣調(diào)蛋白氨基酸序列及其基因序列,一套用于擴增其部分區(qū)域的PCR引物被設(shè)計出來。為了與傳統(tǒng)分類方法相整合,基因組DNA的提取及擴增的方法均得到了改進和優(yōu)化。用這套引物和方法,在青霉的鈣調(diào)蛋白基因中從編碼第9個氨基酸---谷氨酰胺(Gln)的密碼子的第3個核苷酸到編碼第122個氨基酸---纈氨酸(Val)的密碼子的第3個核苷酸被成功擴增出來。這個區(qū)段包含了青霉鈣調(diào)蛋白基因第2和第5外元(exon)的部分序列和全部三個內(nèi)元 (intron) 序列約600bp左右,可直接進行雙向直通測序,非常適用于青霉的種系學研究。 

【關(guān)鍵詞】DNA提取; PCR; 種系學; 正青霉; 籃狀菌; 青霉菌;