【作者】李美娜 吳謝軍 李春燕 馮伯森 李慶偉

【機(jī)構(gòu)】遼寧師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 大連雙天新藥研究開發(fā)中心 遼寧師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 大連116029 大連116031

【摘要】利用PCR-RFLP和RAPD方法對(duì)野生馴化蛹蟲草及其退化菌種進(jìn)行了基因水平的分析。PCR-RFLP實(shí)驗(yàn),采用真菌通用引物ITS1和ITS4,擴(kuò)增出5.8S和其兩端的兩個(gè)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS),選用5種識(shí)別四個(gè)堿基的內(nèi)切酶(HaeIII、AfaI、TagI、AluI和XspI),其中只XspI酶切結(jié)果在兩個(gè)菌種中存在差異,進(jìn)一步測(cè)序表明,整個(gè)片段全長(zhǎng)534bp,共有13個(gè)位點(diǎn)發(fā)生堿基突變,且都為c轉(zhuǎn)換為t。RAPD實(shí)驗(yàn),選用4組計(jì)80個(gè)隨機(jī)引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,共篩選出9個(gè)對(duì)所有供試個(gè)體均存在明顯差異的引物。結(jié)果表明了退化菌株較野生馴化菌株在DNA水平上發(fā)生了頻率較高的突變,這些突變可能直接與導(dǎo)致菌種退化的基因相關(guān)聯(lián)。 

【基金】大連市科技局重點(diǎn)推廣項(xiàng)目:(2002—05)；

【關(guān)鍵詞】馴化菌株; 退化菌株; 5.8SrRNA; RFLP; RAPD;