【作者】陳利鋒 Thomas M HOHN
【機(jī)構(gòu)】南京農(nóng)業(yè)大學(xué)植病系;農(nóng)業(yè)部病蟲監(jiān)測與治理重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室;Novartis Agribusiness Biotechnology Research;Research Triangle Park;
【摘要】為研究禾谷鐮孢菌Fusarium graminearum Schw.單端孢霉烯族毒素生物合成基因(產(chǎn)毒基因)在寄主體內(nèi)的表達(dá),作者構(gòu)建了帶報(bào)告基因GUS((-葡糖苷酸酶基因)的質(zhì)粒pGUSTRI6P5,并通過對野生型菌株的轉(zhuǎn)化獲得禾谷鐮孢高產(chǎn)毒菌株。該質(zhì)粒含有由TRI5(禾谷鐮孢單端孢霉二烯合酶基因)啟動(dòng)子(TRI5 Prom)驅(qū)動(dòng)的GUS基因編碼區(qū)、潮霉素B抗性基因和擬枝孢鐮孢F. sporotrichioides的產(chǎn)毒調(diào)控基因TRI6(FSTRI6)。用pGUSTRI6P5轉(zhuǎn)化野生型菌株GZ3639后,在含潮霉素 B的培養(yǎng)基上選取抗性菌落,單孢分離獲單孢菌株(轉(zhuǎn)化子)。在GYEP(葡萄糖-酵母粉-蛋白胨)液體培養(yǎng)基上,轉(zhuǎn)化子B4-1和B16-1的GUS比活力強(qiáng),15-AcDON(15-乙酰脫氧雪腐鐮刀菌烯醇)產(chǎn)量高,且兩者呈正相關(guān)(相關(guān)系數(shù)(r)分別為0.9839和0.9523)。B4-1和B16-1兩個(gè)轉(zhuǎn)化子可作為研究禾谷鐮孢與其寄主相互作用的工具菌株。
【基金】國家自然科學(xué)基金;國家留學(xué)基金資助;
【關(guān)鍵詞】禾谷鐮孢; 單端孢霉烯族毒素; 報(bào)告基因; 轉(zhuǎn)化子;