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    赤霉菌原生質(zhì)體DNA轉(zhuǎn)化


    【發(fā)布日期】:2018-01-15  【來源】:菌物學(xué)報
    【作者】朱平 楊金玲 朱慧新 程克棣
    【機構(gòu)】中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院;中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)藥物研究所;衛(wèi)生部天然藥物生物合成重點實驗室;
    【摘要】雷丸(OmphalialapidescensSchroct.)經(jīng)過Tris-HCl緩沖液浸提,硫酸銨分級沉淀,離子交換,卵粘蛋白-Sepharose4B親和層析以及Sephacryl-S100分子篩等步驟,純化得到純度為95%以上的雷扎凝集素(簡稱OLL)。比活提高45.8倍,活力回收2.5%。雷丸凝集素是單一肽鏈的蛋白質(zhì),分子量為12kDa,等電點為7.5,可被半乳糖抑制。具有熱穩(wěn)定性及酸堿(pH1~12)穩(wěn)定性。2mmol/L氯化鋅可使其比活提高4倍。同兔血相比,與人血進行凝集反應(yīng),其比活可提高4倍。進行圓二光譜測定,α-螺旋和β-折疊含量較高。與半乳糖間的抑制反應(yīng)瞬間內(nèi)完成,且空間結(jié)構(gòu)變得緊密。
    【基金】人事部留學(xué)回國人員科技活動基金;中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)青年科技人才基金;國家自然科學(xué)基金;
    【關(guān)鍵詞】赤霉菌; 原生質(zhì)體; DNA轉(zhuǎn)化; 潮霉素B抗性基因;
     
     
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