【作者】朱平;何惠霞;岳德超;
【機構】中國醫(yī)學科學院藥物研究所;中國醫(yī)學科學院藥物研究所 北京 100050
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【摘要】本文報道了快速制備麥角菌(Claviceps purpurea)和雀稗麥角菌(Claviceps paspali)原生質體的方法及影響原生質體形成的若干因素。用適當方法培養(yǎng)菌絲體,利用商品溶壁酶制劑(10mg/ml),以0.7mol/l KCl為原生質體高滲液,28℃為酶解溫度,處理時間僅需1—2h,菌絲體細胞壁即被徹底消化而釋放出大量原生質體。在適當?shù)墓腆w再生培養(yǎng)基上,兩種麥角菌原生質體的再生頻率分別為7.7%和13.2%左右。培養(yǎng)基中添加25mg/l脫氧膽酸鈉有利于形成易于計數(shù)和分離的小菌落。本文還就CaCl2,MgCl2及低溫保藏(3—4℃,30天)對于原生質體穩(wěn)定性與再生的影響作了初步探討,并證實溶壁酶對原生質體有明顯的破壞作用。
【關鍵詞】麥角菌;原生質體形成;再生;
【基金】中國醫(yī)學科學院青年科學基金;