【作者】郭慧;R.N.庫利;
【機構(gòu)】北京農(nóng)業(yè)大學(xué)生物學(xué)院;伯明翰大學(xué)遺傳系;北京;英國;
【摘要】本文報道了利用具有潮霉素抗性標(biāo)記的質(zhì)粒(pAN7-1)對粟長蠕孢菌原生質(zhì)體進(jìn)行轉(zhuǎn)化的結(jié)果。經(jīng)pAN7-1質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化處理的粟長蠕孢菌原生質(zhì)體在含潮霉素(200μg/ml)的選擇性培養(yǎng)基上出現(xiàn)兩類轉(zhuǎn)化子。一類是正常轉(zhuǎn)化子,其轉(zhuǎn)化率為2個轉(zhuǎn)化子/μg DNA;另一類是流產(chǎn)轉(zhuǎn)化子,其產(chǎn)生頻率為500—600個轉(zhuǎn)化子/μg DNA。DNA雜交分析結(jié)果表明,在正常轉(zhuǎn)化子中質(zhì)粒DNA以首尾相接、重復(fù)排列的形式整合入受體菌染色體DNA。初篩獲得的轉(zhuǎn)化子多數(shù)以異核狀態(tài)存在,經(jīng)單孢分離純化后可通過有絲分裂穩(wěn)定傳代。
【關(guān)鍵詞】粟長蠕孢菌;轉(zhuǎn)化;潮霉素抗性;