【作者】張渝英；劉年娟；楊開宇；

【機(jī)構(gòu)】中國(guó)科學(xué)院微生物研究所；中國(guó)科學(xué)院微生物研究所；北京；

【摘要】從酵母變異株20B-12經(jīng)過(guò)超聲波處理、硫酸銨沉淀、DEAE纖維素和磷酸纖維素層析等步驟,純化依賴于DNA的RNA聚合酶A和C,得到聚丙烯酰胺凝膠電泳均一的條帶。其中不含DNase、RNase 和蛋白酶活力,無(wú)內(nèi)源DNA。測(cè)定了 RNA 聚合酶A和C對(duì)α-鵝膏葷堿的敏感性。酶A在α-鵝膏葷堿為400μg/ml時(shí),活性受到抑制,而酶C在該濃度時(shí),幾乎不受抑制。（NH4）2SO4對(duì)酶A的最適濃度為20mM,對(duì)酶C有二個(gè)最適濃度,分別為40mM和240mM。無(wú)二價(jià)金屬離子Mn2+或Mg2+,酶A和C幾乎無(wú)活力。兩種酶最適Mn2+濃度均為2.5mM,Mg2+濃度均為5mM。兩種酶以熱變性小牛胸腺DNA為模板,測(cè)活性均較天然小牛胸腺DNA為模板時(shí)高。 

【關(guān)鍵詞】依賴于DNA的RNA聚合酶；釀酒酵母變異株20B-12；RNA 聚合酶的純化；