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    杏鮑菇漆酶基因DNA片段的克隆及序列分析


    【發(fā)布日期】:2014-02-28
      【作者】 薛丹; 郭九峰; 那日; 劉騰; 
     
      【機構(gòu)】 內(nèi)蒙古大學(xué)自治區(qū)離子束生物工程重點實驗室; 
     
      【摘要】 參照Genbank中發(fā)表的杏鮑菇漆酶基因序列(No.AY686700),并根據(jù)真菌漆酶氨基酸序列保守區(qū)設(shè)計特異性引物。以杏鮑菇基因組DNA為模板,PCR擴增出長2 606 bp的漆酶基因片段,DNA經(jīng)純化后克隆到pGM-T載體上,經(jīng)篩選、PCR鑒定和序列分析,證明該片段為完整的杏鮑菇漆酶基因(Genbank注冊號KC789846)。通過對基因序列的內(nèi)含子/外顯子進行預(yù)測分析,獲得漆酶編碼區(qū)的cDNA,該基因的開放閱讀框由1 596個核苷酸組成,編碼一個由531個氨基酸組成的多肽,分子量大小約為56 682.0,等電點pI為4.56;比對結(jié)果發(fā)現(xiàn)該基因氨基酸序列與其他真菌漆酶的同源性最高達93%;進一步對X22-12漆酶二級結(jié)構(gòu)進行分析,并通過SWISS-MODEL預(yù)測了該酶的三維結(jié)構(gòu)。 
     
      【關(guān)鍵詞】 杏鮑菇; 漆酶基因; 基因克??; 序列分析; 
     
      【基金】 國家自然科學(xué)基金(No.51267014)
     
      【分類號】S646 
     
     
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