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    抑制消減雜交法分離與鑒定靈芝G蛋白β亞基基因


    【發(fā)布日期】:2012-06-12

    【作者】 徐軍偉; 趙蔚; 鐘建江;

    【機(jī)構(gòu)】 華東理工大學(xué)生物反應(yīng)器工程國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 上海交通大學(xué)微生物代謝國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;

    【摘要】 靈芝細(xì)胞在液體靜置和振蕩培養(yǎng)方式下,抗癌物質(zhì)靈芝酸的產(chǎn)量有顯著的差別。采用抑制消減雜交法分離了靈芝細(xì)胞在兩種不同培養(yǎng)方式下差異表達(dá)的基因,對(duì)構(gòu)建的差減文庫(kù)進(jìn)行篩選后獲得了一個(gè)靈芝的EST序列。根據(jù)這個(gè)EST序列,采用RACE-PCR的方法成功克隆到了靈芝G蛋白β亞基(Gb)基因(GenBank登錄號(hào)GQ293361)。序列分析顯示這個(gè)基因cDNA全長(zhǎng)1217bp,編碼了313個(gè)氨基酸。同源性分析表明其編碼的氨基酸與其他蘑菇類(lèi)真菌Gβ的氨基酸序列同源性較高,與Coprinopsis cinerea(XP001830441.1)、Lentinula edodes(AAP13580.2)和Schizophyllum commune(XP003029882.1)的一致性分別達(dá)到91%、91%和90%。實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果表明這個(gè)基因在液體靜置培養(yǎng)方式下的表達(dá)量顯著高于振蕩培養(yǎng)。

    【關(guān)鍵詞】 靈芝G蛋白β亞基; 差異表達(dá);
     
    【基金】 國(guó)家自然科學(xué)基金“靈芝真菌液體靜態(tài)培養(yǎng)過(guò)程中靈芝酸積累的調(diào)控研究”(20776084)

    【分類(lèi)號(hào)】S567.31
     

     
     
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