羊肚菌是世界名貴的珍稀食用菌,深受廣大消費(fèi)者的喜愛。2012年我國(guó)在羊肚菌大田外援營(yíng)養(yǎng)袋栽培技術(shù)研發(fā)上取得突破,近年來栽培面積逐年增加。但羊肚菌生活史不清晰,基礎(chǔ)生物學(xué)研究嚴(yán)重滯后,生產(chǎn)中也經(jīng)常出現(xiàn)減產(chǎn)或絕產(chǎn)等現(xiàn)象。
近期華中農(nóng)業(yè)大學(xué)應(yīng)用真菌團(tuán)隊(duì)構(gòu)建了兩種細(xì)胞核熒光標(biāo)記的重組載體,采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化方法,對(duì)梯棱羊肚菌兩種交配型單孢菌株的細(xì)胞核進(jìn)行熒光標(biāo)記。結(jié)果顯示綠色熒光蛋白eGFP和紅色熒光蛋白mCherry均能在梯棱羊肚菌菌絲中穩(wěn)定表達(dá)。將兩種不同熒光蛋白標(biāo)記的菌絲進(jìn)行配對(duì)培養(yǎng),觀察到菌絲細(xì)胞融合形成異核體的現(xiàn)象。本研究為羊肚菌基礎(chǔ)生物學(xué)及遺傳學(xué)研究提供了關(guān)鍵技術(shù)方法,對(duì)開展羊肚菌基因功能研究和雜交育種具有重要意義。
相關(guān)研究論文Construction of Nucleus-directed fluorescent reporter systems and its application to verification of heterokaryon formation in Morchella importuna在線發(fā)表于Frontiers in Microbiology羊肚菌生理生態(tài)???。博士生張倩倩和碩士生舒芳為論文共同第一作者,邊銀丙教授、康恒副教授為論文共同通訊作者。該研究得到國(guó)家自然科學(xué)基金(32070095)和華中農(nóng)業(yè)大學(xué)-中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院深圳農(nóng)業(yè)基因組研究所合作基因(JCKY2020-60)資助。
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https://doi.org/10.3389/fmicb.2022.1051013
圖1 熒光蛋白標(biāo)記的梯陵羊肚菌菌絲細(xì)胞核及DAPI染色的細(xì)胞核
圖2 菌絲融合形成的梯陵羊肚菌異核體菌株的細(xì)胞核熒光觀察