林汝楷（三明真菌研究所，365000）

羊肚菌是著名的珍稀美味食用菌,百余年來人工栽培羊肚菌一直是真菌學(xué)家和業(yè)余愛好者最感興趣的課題之一。國內(nèi)外均有報(bào)道稱已實(shí)現(xiàn)羊肚菌的人工栽培，但迄今為止仍未見商品化人工栽培羊肚菌的報(bào)道。本文概述國內(nèi)外羊肚菌分類學(xué)、生態(tài)學(xué)、遺傳學(xué)和栽培學(xué)研究的最新進(jìn)展，以期促進(jìn)國內(nèi)的羊肚菌研究。

1．羊肚菌的分類研究

所有羊肚菌均屬于盤菌目（Peziales）、羊肚菌科（Morchellaceae）、羊肚菌屬（Morchella）子囊菌。由于羊肚菌的子實(shí)體具有很高的多態(tài)現(xiàn)象（Polymorphism），傳統(tǒng)的形態(tài)分類法對(duì)羊肚菌種的命名爭(zhēng)議很大。，有的研究者認(rèn)為羊肚菌有3種或6種，有的研究者則認(rèn)為多達(dá)28種或50種（GuzmanandTapia,1998）

有的研究者通過長期的野外觀察，認(rèn)為小羊肚菌（M.deliciosa）、美味羊菌肚菌（M.esculenta）與粗柄羊肚菌（M.crassipes）可能分別屬于同一生物學(xué)種的早、中、晚三個(gè)發(fā)育階段；黑脈羊肚菌（M.angusticeps）、尖頂羊肚菌（M.conica）與高羊肚菌（M.elata）也可能分別屬于同一生物學(xué)種的早、中、晚三個(gè)發(fā)育階段（Bunyard等，1994）。VolkandLeonard（1989，a）根據(jù)菌絲融合試驗(yàn)認(rèn)為小羊肚菌、美味羊肚菌和粗柄羊菌即使不是屬于同一個(gè)種，在遺傳上也必定存在密切關(guān)系。Gessner等（1987）和Yoon等（1990）根據(jù)同功酶電泳分析結(jié)果認(rèn)為小羊肚菌與美味羊肚菌屬于同一個(gè)種。Jun等（1993）根據(jù)酶聯(lián)免疫吸附分析（ELISA）結(jié)果，認(rèn)為小羊肚菌、美味羊肚菌和粗柄羊肚菌屬于同一個(gè)種。

Bunyard等（1994）通過28SRNA基因的RFLP分析，認(rèn)為羊肚菌至少還有兩個(gè)分類群：（1）黑色羊肚菌，包括黑脈羊肚菌、尖頂羊肚菌和高羊肚菌；（2）黃色羊肚菌，包括小羊肚菌、美味羊肚菌和粗柄羊肚菌，并且認(rèn)為同一分類群的羊肚菌屬于同一個(gè)種。Guzman andTapia（1998）通過細(xì)致的觀察比較，認(rèn)為除了上述二個(gè)分類群，以及一個(gè)以半開羊肚菌（M.semilibera）為代表的分類群外。羊肚菌還有一個(gè)菌柄會(huì)變紅的分類群，包括紅褐羊肚菌（M.rufobrunnea），危地馬拉羊肚菌（M.guatemalensis）和類硬羊肚菌（M.regidoides），這類羊肚菌主要分布于熱帶與亞熱帶地區(qū)。

2.羊肚菌的生態(tài)研究

羊肚菌的分布很廣，在溫帶、熱帶與亞熱帶地區(qū)均有分布。發(fā)生地復(fù)雜多樣，在河岸邊、山地斜波、草地和火燒山都有可能發(fā)生；發(fā)生地的土質(zhì)也復(fù)雜多樣，可以是沙地、富含有機(jī)質(zhì)的濕土或泥漿地。有報(bào)道稱，羊肚菌是腐生菌，但也可能與高等植物形成菌根。

溫度對(duì)羊肚菌的發(fā)生影響較大，早春雪季剛過，大地初曖之時(shí)特別有利于羊肚菌的發(fā)生。羊肚菌是耐低溫真菌，在低溫下有較強(qiáng)的生長競(jìng)爭(zhēng)力（Schmidt,1983）。土溫在10℃以下時(shí)，將羊肚菌菌絲或菌核與黑麥種子一起埋于地下，不久可見黑麥種子上長滿羊肚菌菌絲；若土溫在10℃以上，則從黑麥種子上只能分離到其它真菌菌絲。羊肚菌的發(fā)生季節(jié)很短，一般發(fā)生于四月底至五月初，通常只持續(xù)三個(gè)星期左右。但也有例外，Goldway等（2000）報(bào)道以色列北部的Dan自然保護(hù)區(qū)尖頂羊肚菌發(fā)生季節(jié)長達(dá)8-10個(gè)月，從早春一直延續(xù)到冬季中期。他們還觀察到土壤濕度的突然降低是羊肚菌子實(shí)體形成的一個(gè)主要誘因。

3．羊肚菌的遺傳研究

VolkandLeonard（1989，a）根據(jù)羊肚菌子囊孢子菌絲培養(yǎng)物之間的菌絲融合試驗(yàn)、耐藥性突變株互補(bǔ)培養(yǎng)試驗(yàn)和融合菌絲的細(xì)胞核染色觀察，證明羊肚菌的生活史中確實(shí)存在異核體階段。Yoon等（1990）通過同功酶電泳分析認(rèn)為羊肚菌的子囊孢子為單倍體；若干菌柄組織的菌絲培養(yǎng)物也是單倍體。

VolkandLeonard（1990）研究發(fā)現(xiàn)：（1）羊肚菌每個(gè)子囊含有8個(gè)子囊孢子，每個(gè)子囊孢子含有8個(gè)細(xì)胞核；（2）子囊孢子單孢子菌絲培養(yǎng)物在CYM培養(yǎng)基（添加酵母膏的完全培養(yǎng)基）上生長很快，菌絲之間互相交織，融合頻率比一般真菌高得多。每個(gè)菌絲細(xì)胞平均含有10-15個(gè)細(xì)胞核，最多的含有65個(gè)細(xì)胞核；（3）異核體菌絲在CYM培養(yǎng)基上能形成眾多小菌核。這是一個(gè)沒有皮組織和髓組織的“假菌核”。在7-10天后，眾多小菌核融合成一個(gè)大菌核。這種大菌核再長出的新菌絲在培養(yǎng)基上能形成原基。他們根據(jù)自己的試驗(yàn)結(jié)果并結(jié)前人的研究資料，推測(cè)出一個(gè)羊肚菌生活史圖。該圖示意如下：

研究羊肚菌生活史比較困難的原因主要有三個(gè)（Buscot,1993）：（1）在自然界中難以觀察到全部發(fā)育過程；（2）人工培養(yǎng)的菌絲體與自然界的菌絲體往往形態(tài)不一樣；（3）人工培養(yǎng)的菌絲體退化速度很快。

4．羊肚菌的栽培研究

羊肚菌具有特殊的跗學(xué)特性和生物學(xué)特性，要實(shí)現(xiàn)人工栽培困難極大。E.Gauman(1964)指出多數(shù)擔(dān)子菌的單倍菌絲經(jīng)一次細(xì)胞結(jié)合形成雙核化菌絲體，只需供給必要的養(yǎng)料，每年都以營養(yǎng)性方式產(chǎn)生新的子實(shí)體，而羊肚菌的單倍體菌絲在每次產(chǎn)生子實(shí)體時(shí)均需經(jīng)體細(xì)胞結(jié)體形成雙核化菌絲。因此栽培羊肚菌存在著既要促使子實(shí)體原基形成，又要激發(fā)雙核化菌絲體形成的雙重困難，栽培難度比一般擔(dān)子菌大得多。

R.Ower（1982）首次報(bào)道在實(shí)驗(yàn)室中實(shí)現(xiàn)了羊肚菌的人工栽培。R.Ower與G.Mills，J.Malachowski三人于1986年和1989年兩次獲得羊肚菌人工栽培的美國專利，專利號(hào)分別為4,594,809和4,866,878。R.Ower等人栽培羊肚菌的技術(shù)關(guān)鍵，主要是在羊肚菌營養(yǎng)生長階段供給養(yǎng)分促其形成菌核，并以菌核作為接種體，然后浸水誘發(fā)菌核長出的新菌絲形成原基，在一定的環(huán)境條件下促使原基長大形成子實(shí)體。

Montgomery（1995）報(bào)道美國Terry農(nóng)場(chǎng)于1993年12月從Domino’sPizzaDistribution公司購買到羊肚菌的人工栽培技術(shù)，并試驗(yàn)栽培成功，產(chǎn)品已上市銷售。該栽培技術(shù)與R.Ower等人的專利技術(shù)相似，將羊肚菌栽培過程分成菌核形成與成熟期（28-35天）、菌絲定植期（6天）、誘導(dǎo)期（1天）和生長期（33天）四個(gè)階段，整個(gè)栽培周期約68-75天。

獲得足夠大的菌核是成功栽培羊肚菌的第一步。VolkandLeonard（1989，b）研究了粗柄羊肚菌大菌核的形成條件，可供研究者借鑒。采用R.Ower等人（1986）的專利技術(shù)介紹的瓶栽法，即瓶子下半層為含水量60%的黑麥培養(yǎng)基，上半層為營養(yǎng)貧瘠的混合土壤[由3份混合純凈土（含有堆肥、腐殖質(zhì)、珍珠巖、沙子、谷殼）、1份泥炭蘚和2份蒸餾水組成，初始pH約5.8，培養(yǎng)基經(jīng)高壓蒸汽滅菌后接入分離自同一子囊的四個(gè)非姐妹子囊孢子的混合菌絲培養(yǎng)物，在25℃、空氣相對(duì)濕度為50%的暗室中培養(yǎng)3-4個(gè)星期可以得到直徑為2-5cm的大菌核。

致謝：黃年來研究員提供寶貴意見與部分文獻(xiàn)。

注：本文發(fā)表于《食用菌》2001年增刊（全國第六屆食用菌學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集）第74――75頁。

示意圖