靈芝菌株的DNA指紋分析 羅聯(lián)忠 林樹(shù)錢(qián) 謝寶貴 林志彬 摘 要：CTAB法提取靈芝菌絲體總DNA,再以核糖體DNA轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITSⅡ、IGR IPCR RFLP)結(jié)合隨機(jī)引物擴(kuò)增多態(tài)性(RAPD)標(biāo)記分析30個(gè)靈芝菌株間的親緣關(guān)系.結(jié)果表明,ITSⅡ、IGR I-PCR RFLP產(chǎn)生了47條帶,其中42條顯示出多態(tài)性,通過(guò)聚類(lèi)分析將30個(gè)菌株分成七大類(lèi),包括紫芝、黑靈芝、樹(shù)舌靈芝、薄樹(shù)靈芝四大類(lèi),以及另外三個(gè)無(wú)法確定具體歸屬的類(lèi)群,但沒(méi)能將赤芝與松杉靈芝區(qū)分開(kāi).RAPD從247個(gè)隨機(jī)引物中篩選出8個(gè)隨機(jī)引物,共檢測(cè)到69個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)并全部顯示出多態(tài)性,通過(guò)聚類(lèi)分析將供試的30個(gè)靈芝菌株全部區(qū)分開(kāi). 關(guān)鍵詞：靈芝;核糖體DNA轉(zhuǎn)錄間隔區(qū);隨機(jī)引物擴(kuò)增多態(tài)性 分類(lèi)號(hào)：S567.310.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1005-9873(2005)03-0007-07 DNA Fingerpinting Analysis of Ganoderma Strains LUO Lian-zhong LIN Shu-qian XIE Bao-gui LIN Zhi-bin 基金項(xiàng)目：綠谷集團(tuán)有限公司靈芝專(zhuān)項(xiàng)科研資金全額資助項(xiàng)目"靈芝菌種DNA鑒別"(項(xiàng)目編號(hào):2003SHGV01),福建省星火計(jì)劃項(xiàng)目"福建食用菌集聚產(chǎn)業(yè)科技服務(wù)體系建設(shè)示范--食用菌種質(zhì)資源庫(kù)建設(shè)、分類(lèi)與認(rèn)定前期技術(shù)研究"(項(xiàng)目編號(hào):2003EAT20021)的部分研究?jī)?nèi)容 作者簡(jiǎn)介：羅聯(lián)忠(1978-),男,2004年畢業(yè)于福建農(nóng)林大學(xué),碩士,主要從事藥用真菌的種質(zhì)資源收集與分子鑒定等工作,發(fā)表主筆論文4篇. 作者單位：羅聯(lián)忠（福州綠谷生物藥業(yè)技術(shù)研究所,福州,350002;福建農(nóng)林大學(xué)菌物研究中心,福州,350002） 林樹(shù)錢(qián)（福州綠谷生物藥業(yè)技術(shù)研究所,福州,350002） 謝寶貴（福建農(nóng)林大學(xué)菌物研究中心,福州,350002） 林志彬（福州綠谷生物藥業(yè)技術(shù)研究所,福州,350002;北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部藥理系,北京,100083） 參考文獻(xiàn)： [1]趙繼鼎,張小青.中國(guó)真菌志(第十八卷,靈芝科)[M].北京:科學(xué)出版社,2000.25. [2]中華人民共和國(guó)藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2000.222. [3]衛(wèi)生部.衛(wèi)生部關(guān)于印發(fā)真菌類(lèi)和益生菌類(lèi)保健食品評(píng)審規(guī)定的通知[B].衛(wèi)法監(jiān)發(fā)[2001]84號(hào). [4]Makimura K. Phylogenetic classification and species identification of dermatophyte strains based on DNA sequences of nuclear ribosomal internal transcribed spacer 1 regions[J]. Clin Microbiol, 1999,37(4):920. [5]李國(guó)利.16S～23S rDNA內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)序列分析及其在分支桿菌鑒定中的應(yīng)用價(jià)值[J].中華結(jié)核和呼吸雜志,2002,25(3):166. [6]Williams JG, Kubelik AR, Livak KJ, et al. DNA polymorphisms amplified by arbitrary primers are useful genetic markers[J]. Nuc Axids Res, 1990,18:6531～6535. [7]Welsh J, McClelland M. Fingerprinting genomes using PCR with arbitrary primers[J]. Nuc Acids Res, 1990,18:7214～7218. 食用菌學(xué)報(bào) 2005年第3期-HTM文件 No.2
