靈芝是我國(guó)傳統(tǒng)中藥的瑰寶,素有神芝、瑞草之稱,是靈芝科靈芝屬(Ganoderma)所有真菌的總稱,自然狀態(tài)下以闊葉樹的腐木作為營(yíng)養(yǎng)材料呈腐生生長(zhǎng)。靈芝在全國(guó)各地都能采集到,但由于森林植被被過度砍伐,越來越多的野生種類已日漸罕見,數(shù)量也日益貧乏。珠海可見靈芝野生分布,主要生長(zhǎng)在臺(tái)灣相思、苦楝等枯樹木材上。
靈芝的代料栽培,通常選用樹木的下腳料或農(nóng)副產(chǎn)品,加入適量的輔料配制而成。由于防臺(tái)風(fēng)等原因,珠海每年要修剪大量行道綠化樹種木材,芒果作為珠海鄉(xiāng)土樹種,多被選作行道綠化樹。如何讓木材廢料得到更充分的利用,變廢為寶,中國(guó)農(nóng)業(yè)網(wǎng)的筆者通過以芒果作為靈芝栽培基質(zhì)主要木材原料,加入棉籽殼、麥麩等輔料以代料栽培方法種植靈芝,以確定具有珠海特色的代料栽培基質(zhì)配方。
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)地概況
本項(xiàng)目的研究試驗(yàn)設(shè)在珠海市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究中心梅溪基地,地處廣東省南部,為南亞熱帶季風(fēng)氣候,日照充足,年平均氣溫22.4 ℃,年平均相對(duì)濕度為79%,適合靈芝的周年栽培。
1.2 試驗(yàn)材料
1.2.1 木屑原料 選用珠海廣泛種植的園林綠化樹種芒果木材,側(cè)枝直徑大于4cm。木材于2009年5、6月在珠海市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究中心梅溪基地內(nèi)采伐,粉碎成直徑≤5 mm的木屑顆粒。
1.2.2 供試菌株 由華中農(nóng)業(yè)大學(xué)菌種實(shí)驗(yàn)中心提供的美國(guó)大靈芝菌株。
1.3 試驗(yàn)方法
1.3.1 母種培養(yǎng)基 PDA培養(yǎng)基(1000 mL):馬鈴薯 200 g、葡萄糖 20 g、蛋白胨 1 g、磷酸二氫鉀 1 g、瓊脂粉 15 g,加水至1 000 mL。
1.3.2 原種培養(yǎng)基 芒果木屑73%,麥麩25%,硫酸鈣2%。
1.3.3 栽培種培養(yǎng)基 根據(jù)質(zhì)量比例,栽培種培養(yǎng)基處理1~6中,芒果木屑、棉籽殼、麥麩三者的含量分別為:處理1,39.5%、39.5%、20%;處理2,59%、20%、20%;處理3,69%、10%、20%;處理4,69%、20%、10%;處理5,79%、10%、10%;處理6,89%、0%、10%。各培養(yǎng)基另加硫酸鈣1%,培養(yǎng)基含水量60%。
1.3.4 栽培管理與統(tǒng)計(jì) 栽培包用規(guī)格為17 cm×30 cm的聚丙烯塑料袋裝1 kg濕重栽培料,于121 ℃,0.15 MPa蒸汽滅菌 2.5 h。冷卻后以雙頭方式接種,接種后將菌包封口,整齊堆放。菌絲滿袋后,轉(zhuǎn)入出芝室進(jìn)行開袋出芝管理。實(shí)驗(yàn)安排于7—9月施行,平均氣溫29.1 ℃。每個(gè)處理30包,3次重復(fù),隨機(jī)選10袋進(jìn)行定點(diǎn)觀察記錄,記載菌絲體生長(zhǎng)速度、長(zhǎng)勢(shì)、現(xiàn)蕾時(shí)間、子實(shí)體大小、形狀,靈芝采收后烘干并測(cè)量干質(zhì)量。
2 結(jié)果與分析
2.1 不同培養(yǎng)基對(duì)靈芝菌絲體生長(zhǎng)的影響
從表1看出,不同培養(yǎng)基中,菌絲體長(zhǎng)勢(shì)、生長(zhǎng)速度、滿袋時(shí)間及現(xiàn)蕾時(shí)間均存在明顯差異,處理6生長(zhǎng)最快,菌絲長(zhǎng)勢(shì)最弱,滿袋時(shí)間最短,但現(xiàn)蕾時(shí)間最長(zhǎng);處理5、3生長(zhǎng)較快,滿袋時(shí)間較短,處理3較處理5菌絲長(zhǎng)勢(shì)較好,現(xiàn)蕾時(shí)間短些;處理2、4菌絲生長(zhǎng)較慢,滿袋時(shí)間較長(zhǎng),處理2較處理4菌絲長(zhǎng)勢(shì)好,現(xiàn)蕾時(shí)間短些;處理1菌絲萌發(fā)速度、生長(zhǎng)速度最慢,滿袋時(shí)間最長(zhǎng),但菌絲長(zhǎng)勢(shì)最好,現(xiàn)蕾時(shí)間最短。這些說明:麥麩含量對(duì)菌絲長(zhǎng)勢(shì)及現(xiàn)蕾開傘起關(guān)鍵性作用,含量為20%時(shí)菌絲濃密粗壯,現(xiàn)蕾、開傘時(shí)間短,含量為10%時(shí)菌絲稀疏,現(xiàn)蕾、開傘時(shí)間較長(zhǎng);芒果木屑含量較高時(shí),菌絲萌發(fā)及生長(zhǎng)速度較快,滿袋時(shí)間較短,但由于木屑間隙較大,導(dǎo)致菌絲稀疏,不結(jié)實(shí),不均勻,現(xiàn)蕾時(shí)間推遲。
2.2 不同培養(yǎng)基對(duì)靈芝子實(shí)體形態(tài)的影響
由表2看出,6個(gè)處理中,子實(shí)體形狀分為2個(gè)類別,處理1、2、3的子實(shí)體菌蓋為扇形,色澤較淺,菌柄為扁圓柱形;處理4、5、6的子實(shí)體菌蓋為橢圓形至圓形,色澤較深,菌柄細(xì)長(zhǎng),呈圓柱形。菌蓋的長(zhǎng)度、寬度、厚度及菌柄長(zhǎng)度、粗度均存在明顯差異。菌蓋長(zhǎng)度、寬度及菌柄粗度均是處理1>處理2>處理3>處理4>處理5>處理6;菌柄長(zhǎng)度為:處理6>處理5>處理4>處理3>處理2>處理1;菌蓋厚度為:處理6>處理5>處理4>處理1>處理3>處理2。說明麥麩含量對(duì)子實(shí)體菌蓋形態(tài)也起關(guān)鍵性作用,這與麥麩含量影響現(xiàn)蕾開傘時(shí)間相一致。麥麩含量高時(shí),由于開傘時(shí)間早,菌蓋寬大,菌柄較短且粗壯;麥麩含量低,開傘時(shí)間推遲,子實(shí)體形狀更偏似于野生靈芝。另外,隨著芒果木屑與棉籽殼配比的降低,菌蓋逐漸變小。
2.3 不同培養(yǎng)基對(duì)靈芝子產(chǎn)量及藥用成分的影響
由表3看出,各處理靈芝子實(shí)體產(chǎn)量及生物學(xué)效率與其形狀大小呈正相關(guān),即處理1、2、3的子實(shí)體干質(zhì)量、孢子粉干質(zhì)量及生物學(xué)效率均較高,而處理4、5、6該3項(xiàng)指標(biāo)的數(shù)值較低;但就藥效成分比較,6個(gè)處理在靈芝多糖、總?cè)?、鍺的含量方面,沒有明顯差異。為進(jìn)一步探討不同培養(yǎng)基對(duì)靈芝子實(shí)體產(chǎn)量的影響,針對(duì)子實(shí)體干質(zhì)量作方差分析及Duncan’s新復(fù)極差測(cè)驗(yàn),結(jié)果如表4、表5。
方差分析結(jié)果表明,不同培養(yǎng)基對(duì)靈芝產(chǎn)量存在極顯著影響,Duncan’s新復(fù)極差測(cè)驗(yàn)結(jié)果表明,處理1、2、3與處理4、5、6間存在極顯著差異,說明麥麩含量是靈芝產(chǎn)量的主導(dǎo)因素;而處理1、2、3相互間不存在顯著差異,子實(shí)體產(chǎn)量均較高,處理4、5、6相互間不存在顯著差異,子實(shí)體產(chǎn)量均較低,隨著木屑比例的增加,子實(shí)體產(chǎn)量輕微下降。
3 結(jié)論與討論
1)以芒果木屑作為靈芝栽培的主料,質(zhì)量比例在39.5%~79%之間,均適合靈芝的生長(zhǎng),各處理的藥效成分無明顯差異,菌絲體生長(zhǎng)迅速、子實(shí)體形態(tài)正常。作為代料栽培的主要原料,必須對(duì)芒果木屑粉碎質(zhì)量嚴(yán)格控制,做到大小適度,形狀均勻,以確保菌包質(zhì)量一致。芒果作為珠海鄉(xiāng)土樹種,多被選擇作為行道綠化樹,就珠海氣候條件而言,芒果在當(dāng)?shù)厮募揪艽侔l(fā)新梢,枝條以春夏生長(zhǎng)最為旺盛,然而旺盛的樹冠到了臺(tái)風(fēng)季節(jié)又為防風(fēng)搶險(xiǎn)帶來難題,因此,珠海每年要修剪大量芒果木材。通過以芒果木屑作為靈芝栽培基質(zhì),讓當(dāng)?shù)啬静膹U料得到更充分的利用,變廢為寶,又節(jié)約生產(chǎn)成本,一舉兩得。
2)培養(yǎng)基中麥麩的添加量達(dá)到20% 時(shí),菌絲體結(jié)實(shí)、粗壯,現(xiàn)蕾時(shí)間短,子實(shí)體菌蓋寬大,產(chǎn)量高。這與麥麩作為含氮量高的輔料,能均衡基質(zhì)中的碳氮比有關(guān)。
3)培養(yǎng)基主料中,芒果木屑與棉籽殼同為含碳量高的成分,兩者的營(yíng)養(yǎng)功能相同,但隨著芒果木屑對(duì)棉籽殼質(zhì)量比例的增加,使子實(shí)體形狀及產(chǎn)量有輕微下降,這主要與棉籽殼的物理性質(zhì)有關(guān),其透氣性好、可塑性強(qiáng),能有效填充芒果木屑間隙,使培養(yǎng)基松緊適度,菌絲生長(zhǎng)均勻,更有利于菌絲體后期的生長(zhǎng)及提前現(xiàn)蕾時(shí)間。因此,建議在以芒果木屑作為靈芝栽培主料的基礎(chǔ)上,適當(dāng)添加棉籽殼作為緩沖料,成分以5%~10%為宜。
4)靈芝栽培的常用主、輔料包括:臺(tái)灣相思木屑、棉籽殼、玉米粉、麥麩等,在珠海地區(qū)均需通過采購(gòu)、物流等途徑方可獲得,致使該行業(yè)生產(chǎn)成本高,原料供應(yīng)受季節(jié)制約,現(xiàn)階段靈芝種植行業(yè)廣泛應(yīng)用的配方原料成本約為1 400元·t-1。因此,在選擇芒果木材作為基質(zhì)主料的同時(shí),在確保產(chǎn)品質(zhì)量的前提下,應(yīng)盡可能降低各種外來物料的添加量。建議珠海地區(qū)靈芝栽培芒果木屑培養(yǎng)基配方為:芒果木屑69%、棉籽殼10%、麥麩20%、硫酸鈣1%,培養(yǎng)基含水量60%,芒果木屑粉碎成直徑≤5 mm的顆粒,估算該配方成本為600元·t-1。