菌種的分離與篩選是在食用菌栽培過(guò)程中的重中之重。食用菌的菌種在使用過(guò)程中存在著變異與退化，尤其是草菇菌絲，生長(zhǎng)快退化也快，因此要定期引種或提純復(fù)壯，才能保證菌種質(zhì)量及種性穩(wěn)定，從而為最終產(chǎn)量穩(wěn)定打下基礎(chǔ)。
1 組織分離
工廠化生產(chǎn)草菇時(shí)，為了保證種性穩(wěn)定，大多采用定期組織分離、嚴(yán)格篩選，獲得菌種。一般每次選擇種菇時(shí)，首先要選擇出菇好（產(chǎn)量高，整體菇形大小適中，整齊度高）的菇房，菇房?jī)?nèi)無(wú)明顯病蟲(chóng)害；其次在此菇房?jī)?nèi)選擇出菇最好的床架，從該床架中挑選出菇最好的料層；在該料層上最好的一片菇中選擇無(wú)雜菌蟲(chóng)害、生長(zhǎng)健壯、非常結(jié)實(shí)、底盤(pán)肥大的草菇幼菇（五六分熟，呈小水蜜桃狀）3～4個(gè)。采下幼菇立即放入無(wú)菌或潔凈的塑料袋中，連同分離用的試管培養(yǎng)基帶到菌種室超凈工作臺(tái)。
組織分離時(shí)，先用75%的消毒酒精消毒雙手和工具以及種菇表面（操作熟練者也可不消毒種菇表面），用充分灼燒的手術(shù)刀先在縱面上淺淺的環(huán)切一道（不要切破外菌幕），在種菇的基部從正中切開(kāi)一個(gè)小口，用手捏種菇外部剝開(kāi)菇蕾，在菇蓋與菇柄交界處用滅過(guò)菌冷卻后的手術(shù)刀淺切一個(gè)“田”字形，每個(gè)小塊3～4mm見(jiàn)方（盡量不要?jiǎng)澊┕饺庥|及菌褶），直接用刀將菌肉小塊接入試管培養(yǎng)基上，塞上棉塞。將菌肉小塊拍到試管底部，置于29～31℃環(huán)境培養(yǎng)。分離到的試管要達(dá)到24支左右，如因操作失誤而達(dá)不到此數(shù)量，要補(bǔ)充合格種菇再分離。
2 分離菌株的鑒定與篩選
2.1 初篩1
?、僖话惴蛛x培養(yǎng)3d左右菇肉上萌發(fā)出白色菌絲，此時(shí)挑出因操作不過(guò)關(guān)而導(dǎo)致斜面感染雜菌的試管，余下繼續(xù)培養(yǎng)；
?、诖z長(zhǎng)至2cm左右時(shí)，觀察菌絲生長(zhǎng)情況：a基內(nèi)菌絲整齊濃密，纖細(xì)有力呈銀灰色，生長(zhǎng)速度快；氣生菌絲爬壁能力強(qiáng)，長(zhǎng)勢(shì)整齊一致的繼續(xù)培養(yǎng)；b.基內(nèi)菌絲很稀疏，氣生菌絲長(zhǎng)勢(shì)混亂，氣生菌絲發(fā)白，氣生菌絲遠(yuǎn)比基內(nèi)苗絲多或者感染雜菌，只要出現(xiàn)其中一種情況就剔除；
?、塾^察滿管快慢，標(biāo)注滿管時(shí)間；
?、苡^察厚垣孢子出現(xiàn)早晚，標(biāo)注時(shí)間；優(yōu)先選擇先滿管先出現(xiàn)厚垣孢子的試管，留最好的12株，不足則有多少留多少。
2.2 初篩2
?、賹⑹Ｓ嗟?2株編號(hào)VZl～VZ12，取尖端菌絲轉(zhuǎn)管，底部3cm不動(dòng)，每支轉(zhuǎn)20～30支，對(duì)應(yīng)標(biāo)注VZlMI～VZ12M1；
②轉(zhuǎn)管后剩余的菌種，在酒精燈下，敲破試管底部 （可用小砂輪沿底部無(wú)培養(yǎng)基處用力劃出痕跡，然后在火焰上稍稍烤一下，如未破裂，迅速用冷的酒精棉球冷卻可使試管底部破裂），用滅過(guò)菌的打孔器在底部1～2cm位置打孔取樣（打孔器直徑4～5mm），打2排孔，每排2個(gè)；靠基部的那排接到平板中央，另一排接到平板邊沿；菌絲面貼培養(yǎng)基，標(biāo)注與轉(zhuǎn)管試管相同，置于29～31℃倒置培養(yǎng)；
?、坜D(zhuǎn)管試管的篩選方式與下述“草菇母種轉(zhuǎn)管篩選”相同；平板分2塊：接在中央的菌種，主要對(duì)比菌絲形態(tài)，色澤、均一度，是否存在角變，淘汰不穩(wěn)定的菌株；接在邊沿的菌株，主要比較每組的平均生長(zhǎng)速度，如果平板的蓋板無(wú)冷凝水的，比較其爬壁力；綜合評(píng)比后，篩選出最佳的8株。
2.3 復(fù) 篩
?、俅裨咦映霈F(xiàn)后，將篩選出的8個(gè)菌株的試管置于20℃下避光保藏；
?、?株菌株挑最好的1～2個(gè)平板接原種，離接種塊2cm處打孔取樣，每個(gè)樣接1袋原種，菌絲面貼料面。每個(gè)菌株接30袋，29～31℃避光培養(yǎng)，記錄其生長(zhǎng)速度、觀測(cè)菌絲色澤及長(zhǎng)勢(shì)（原種培養(yǎng)基須按配方精確稱(chēng)量，嚴(yán)格控制料水比，拌料均勻，裝袋重量、高度、松緊度一致）。
?、酆Y選出表現(xiàn)最佳的4個(gè)菌株，每個(gè)菌株挑最好的20袋原種，5袋置于20℃避光保藏，15袋進(jìn)行出菇試驗(yàn)。
3 出菇試驗(yàn)
出菇試驗(yàn)對(duì)于所有食用菌的育種都是最關(guān)鍵的一步，通過(guò)出菇試驗(yàn)比較不同菌株之間的優(yōu)劣，篩選出不同菌株適合的生產(chǎn)模式。
草菇組織分離平板接原種的同時(shí)，外來(lái)引種經(jīng)轉(zhuǎn)管篩選后的母種，每個(gè)菌株接30袋原種；當(dāng)厚垣孢子都出現(xiàn)后，每個(gè)菌株挑出較好的15袋做出菇試驗(yàn)。
?、?個(gè)菌株加外來(lái)引種各 15袋，每個(gè)菌株每組5袋，3個(gè)重復(fù)；
?、谘氐撞空劢歉钊ゴ?，袋口留2cm，多余割去，排在菇床架上；
?、蹏姵龉剿撼龉剿臏囟取H值與正常出菇水相同，總水量約為原種干重的30%，噴完出菇水后蓋無(wú)紡布進(jìn)入催蕾環(huán)節(jié)；出菇水根據(jù)實(shí)際情況調(diào)節(jié)，做到底部不滴水，寧少勿多，防止因水分過(guò)多造成大幅度減產(chǎn)。
④催蕾及出菇管理與常規(guī)同，采收記重時(shí)記錄每組的采收時(shí)間和采收菇重，統(tǒng)計(jì)分析時(shí)每組剔除1袋最差的，其余統(tǒng)計(jì)分析比較平均生物轉(zhuǎn)化率、開(kāi)始出菇時(shí)間和清床時(shí)間；保留生物轉(zhuǎn)化率最高、周期最短的2個(gè)菌株；淘汰的菌株對(duì)應(yīng)的保藏原種停止保藏，保留的2個(gè)菌株對(duì)應(yīng)的保藏原種在有效期內(nèi)輪流轉(zhuǎn)擴(kuò)栽培種投人生產(chǎn)。
4 草菇母種轉(zhuǎn)管篩選
轉(zhuǎn)管前要將種源在29～31℃的環(huán)境下培養(yǎng)24～48h，轉(zhuǎn)管時(shí)要做到空白斜面無(wú)冷凝水，接種塊大小一致，規(guī)格3mm×3mm～4mm×4mm，菌種塊直接掉到底部，不要在培養(yǎng)基上劃過(guò)，29～31℃環(huán)境下避光培養(yǎng)。
?、俳臃N后24h，觀察萌動(dòng)情況，正常12h萌動(dòng)；
?、诮臃N后48h，觀察菌絲生長(zhǎng)情況：a基內(nèi)菌絲整齊濃密，纖細(xì)有力呈銀灰色，生長(zhǎng)速度快；氣生菌絲爬壁能力強(qiáng)，長(zhǎng)勢(shì)整齊一致的繼續(xù)培養(yǎng)；b基內(nèi)菌絲很稀疏，氣生菌絲長(zhǎng)勢(shì)混亂，氣生菌絲發(fā)白，氣生菌絲遠(yuǎn)比基內(nèi)菌絲多或者感染雜菌，出現(xiàn)其中一種情況要剔除；c相對(duì)a而言，生長(zhǎng)速度略慢，標(biāo)注后對(duì)比培養(yǎng)（有些種塊在接種時(shí)燙傷而萌動(dòng)慢造成的，后期培養(yǎng)指標(biāo)合格可以使用）；
?、劢臃N后72h，觀察氣生菌絲的爬壁能力，將爬壁能力較弱的剔除；
?、芙臃N后84～120h，正常菌絲滿管，比較檢查時(shí)要將培養(yǎng)不同天數(shù)滿管的標(biāo)注并分開(kāi)（分成3類(lèi)）；培養(yǎng)144h未滿管的剔除；
?、萁臃N后156～240h，正常菌絲出現(xiàn)磚紅色厚垣孢子，每天檢查，出現(xiàn)厚垣孢子后，標(biāo)注出現(xiàn)日期，當(dāng)天放置到18～22℃環(huán)境避光保存（保藏時(shí)將不同天數(shù)滿管的分開(kāi)放）；培養(yǎng)240h未出現(xiàn)厚垣孢子的剔除。
注：斜面母種在30d有效保藏期內(nèi)使用的，對(duì)于同一批次同一品種的，優(yōu)先使用菌絲先長(zhǎng)滿的；在菌絲同一天長(zhǎng)滿的里面優(yōu)先使用先出現(xiàn)厚垣孢子的。
5 原種和栽培種的篩選
生產(chǎn)原種和栽培種之前，在接種前48h，取出保藏菌種置于29～31℃下恢復(fù)培養(yǎng)。
原種的篩選標(biāo)準(zhǔn)：以生長(zhǎng)速度、菌絲色澤和健壯程度、厚垣孢子出現(xiàn)早晚為基準(zhǔn)；采用標(biāo)準(zhǔn)棉子殼配方29～31℃培養(yǎng)，一般48～72h封面，8～10d長(zhǎng)滿，12～15d出現(xiàn)厚垣孢子，10d內(nèi)未長(zhǎng)滿的淘汰；菌絲纖細(xì)有力呈銀灰色的保留，菌絲變濃白或局部變濃白的的淘汰；由于配方以及含水量的不同，上述參數(shù)會(huì)有所不同，根據(jù)實(shí)際情況選擇菌絲外觀好生長(zhǎng)速度快的原種，出現(xiàn)厚垣孢子早的更好。
栽培種的篩選與原種基本相同，差異在時(shí)間上，一般使用標(biāo)準(zhǔn)配方在29～31℃培養(yǎng)，48h封面，7～10d長(zhǎng)滿，11～14d出現(xiàn)厚垣孢子，10d內(nèi)未長(zhǎng)滿的淘汰。
6 菌種保藏期限
草菇母種出現(xiàn)厚垣孢子之后立即置于18～22℃環(huán)境避光保藏，30d內(nèi)使用最佳，最長(zhǎng)不超過(guò)60d，草菇原種出現(xiàn)厚垣孢子之后立即置于18～22℃環(huán)境避光保藏，20d內(nèi)使用；草菇栽培種出現(xiàn)厚垣孢子之后最好立即使用，18～22℃下保藏前3天效果最佳，最多存放7d。
注意事項(xiàng)：
?、僭诓莨缴鲜褂玫脑嚬芘囵B(yǎng)基，要注意以下幾點(diǎn)：
a.培養(yǎng)基在配制至分裝前，做到攪拌均勻，防止因試管內(nèi)營(yíng)養(yǎng)差異影響對(duì)菌絲優(yōu)劣的判斷；
b.試管培養(yǎng)基滅菌后冷卻、擺斜面時(shí)要防止出現(xiàn)大量冷凝水，培養(yǎng)基溫度在55～60℃的時(shí)候出鍋，溫度過(guò)高冷凝水多，溫度過(guò)低容易凝固；斜面擺好后要立刻覆蓋一些潔凈的保溫材料，防止凝固時(shí)產(chǎn)生大量冷凝水；如果少量定型的斜面存在冷凝水，應(yīng)剔除；如果大多數(shù)試管都產(chǎn)生冷凝水，可在較密閉的干凈箱體內(nèi)放置干燥劑（如生石灰塊）對(duì)試管進(jìn)行干燥，待斜面上冷凝水除去后立即停止干燥。
②際準(zhǔn)草菇菌種配方：棉子殼84%，麩皮12%，輕質(zhì)碳酸鈣2%，生石灰2%，料水比1∶1；滅菌后pH≤6.0。根據(jù)棉子殼的質(zhì)量?jī)?yōu)劣，酌情添加1%蔗糖。
?、壑芷诘陌才牛涸诟鱾€(gè)環(huán)節(jié)都穩(wěn)定的情況下，一般組織分離、出菇試驗(yàn)90d做一次，如果出現(xiàn)高產(chǎn)菇房，立即做組織分離和出菇試驗(yàn)。一次組織分離到出菇試驗(yàn)結(jié)束需要40d，每次接試管到出現(xiàn)厚垣孢子需要7～10d，每次轉(zhuǎn)管出現(xiàn)厚垣孢子保藏20d需要進(jìn)行下1次轉(zhuǎn)管（每次轉(zhuǎn)管的盡量在保藏1個(gè)月內(nèi)使用），允許轉(zhuǎn)管3次。
1 組織分離
工廠化生產(chǎn)草菇時(shí)，為了保證種性穩(wěn)定，大多采用定期組織分離、嚴(yán)格篩選，獲得菌種。一般每次選擇種菇時(shí)，首先要選擇出菇好（產(chǎn)量高，整體菇形大小適中，整齊度高）的菇房，菇房?jī)?nèi)無(wú)明顯病蟲(chóng)害；其次在此菇房?jī)?nèi)選擇出菇最好的床架，從該床架中挑選出菇最好的料層；在該料層上最好的一片菇中選擇無(wú)雜菌蟲(chóng)害、生長(zhǎng)健壯、非常結(jié)實(shí)、底盤(pán)肥大的草菇幼菇（五六分熟，呈小水蜜桃狀）3～4個(gè)。采下幼菇立即放入無(wú)菌或潔凈的塑料袋中，連同分離用的試管培養(yǎng)基帶到菌種室超凈工作臺(tái)。
組織分離時(shí)，先用75%的消毒酒精消毒雙手和工具以及種菇表面（操作熟練者也可不消毒種菇表面），用充分灼燒的手術(shù)刀先在縱面上淺淺的環(huán)切一道（不要切破外菌幕），在種菇的基部從正中切開(kāi)一個(gè)小口，用手捏種菇外部剝開(kāi)菇蕾，在菇蓋與菇柄交界處用滅過(guò)菌冷卻后的手術(shù)刀淺切一個(gè)“田”字形，每個(gè)小塊3～4mm見(jiàn)方（盡量不要?jiǎng)澊┕饺庥|及菌褶），直接用刀將菌肉小塊接入試管培養(yǎng)基上，塞上棉塞。將菌肉小塊拍到試管底部，置于29～31℃環(huán)境培養(yǎng)。分離到的試管要達(dá)到24支左右，如因操作失誤而達(dá)不到此數(shù)量，要補(bǔ)充合格種菇再分離。
2 分離菌株的鑒定與篩選
2.1 初篩1
?、僖话惴蛛x培養(yǎng)3d左右菇肉上萌發(fā)出白色菌絲，此時(shí)挑出因操作不過(guò)關(guān)而導(dǎo)致斜面感染雜菌的試管，余下繼續(xù)培養(yǎng)；
?、诖z長(zhǎng)至2cm左右時(shí)，觀察菌絲生長(zhǎng)情況：a基內(nèi)菌絲整齊濃密，纖細(xì)有力呈銀灰色，生長(zhǎng)速度快；氣生菌絲爬壁能力強(qiáng)，長(zhǎng)勢(shì)整齊一致的繼續(xù)培養(yǎng)；b.基內(nèi)菌絲很稀疏，氣生菌絲長(zhǎng)勢(shì)混亂，氣生菌絲發(fā)白，氣生菌絲遠(yuǎn)比基內(nèi)苗絲多或者感染雜菌，只要出現(xiàn)其中一種情況就剔除；
?、塾^察滿管快慢，標(biāo)注滿管時(shí)間；
?、苡^察厚垣孢子出現(xiàn)早晚，標(biāo)注時(shí)間；優(yōu)先選擇先滿管先出現(xiàn)厚垣孢子的試管，留最好的12株，不足則有多少留多少。
2.2 初篩2
?、賹⑹Ｓ嗟?2株編號(hào)VZl～VZ12，取尖端菌絲轉(zhuǎn)管，底部3cm不動(dòng)，每支轉(zhuǎn)20～30支，對(duì)應(yīng)標(biāo)注VZlMI～VZ12M1；
②轉(zhuǎn)管后剩余的菌種，在酒精燈下，敲破試管底部 （可用小砂輪沿底部無(wú)培養(yǎng)基處用力劃出痕跡，然后在火焰上稍稍烤一下，如未破裂，迅速用冷的酒精棉球冷卻可使試管底部破裂），用滅過(guò)菌的打孔器在底部1～2cm位置打孔取樣（打孔器直徑4～5mm），打2排孔，每排2個(gè)；靠基部的那排接到平板中央，另一排接到平板邊沿；菌絲面貼培養(yǎng)基，標(biāo)注與轉(zhuǎn)管試管相同，置于29～31℃倒置培養(yǎng)；
?、坜D(zhuǎn)管試管的篩選方式與下述“草菇母種轉(zhuǎn)管篩選”相同；平板分2塊：接在中央的菌種，主要對(duì)比菌絲形態(tài)，色澤、均一度，是否存在角變，淘汰不穩(wěn)定的菌株；接在邊沿的菌株，主要比較每組的平均生長(zhǎng)速度，如果平板的蓋板無(wú)冷凝水的，比較其爬壁力；綜合評(píng)比后，篩選出最佳的8株。
2.3 復(fù) 篩
?、俅裨咦映霈F(xiàn)后，將篩選出的8個(gè)菌株的試管置于20℃下避光保藏；
?、?株菌株挑最好的1～2個(gè)平板接原種，離接種塊2cm處打孔取樣，每個(gè)樣接1袋原種，菌絲面貼料面。每個(gè)菌株接30袋，29～31℃避光培養(yǎng)，記錄其生長(zhǎng)速度、觀測(cè)菌絲色澤及長(zhǎng)勢(shì)（原種培養(yǎng)基須按配方精確稱(chēng)量，嚴(yán)格控制料水比，拌料均勻，裝袋重量、高度、松緊度一致）。
?、酆Y選出表現(xiàn)最佳的4個(gè)菌株，每個(gè)菌株挑最好的20袋原種，5袋置于20℃避光保藏，15袋進(jìn)行出菇試驗(yàn)。
3 出菇試驗(yàn)
出菇試驗(yàn)對(duì)于所有食用菌的育種都是最關(guān)鍵的一步，通過(guò)出菇試驗(yàn)比較不同菌株之間的優(yōu)劣，篩選出不同菌株適合的生產(chǎn)模式。
草菇組織分離平板接原種的同時(shí)，外來(lái)引種經(jīng)轉(zhuǎn)管篩選后的母種，每個(gè)菌株接30袋原種；當(dāng)厚垣孢子都出現(xiàn)后，每個(gè)菌株挑出較好的15袋做出菇試驗(yàn)。
?、?個(gè)菌株加外來(lái)引種各 15袋，每個(gè)菌株每組5袋，3個(gè)重復(fù)；
?、谘氐撞空劢歉钊ゴ?，袋口留2cm，多余割去，排在菇床架上；
?、蹏姵龉剿撼龉剿臏囟取H值與正常出菇水相同，總水量約為原種干重的30%，噴完出菇水后蓋無(wú)紡布進(jìn)入催蕾環(huán)節(jié)；出菇水根據(jù)實(shí)際情況調(diào)節(jié)，做到底部不滴水，寧少勿多，防止因水分過(guò)多造成大幅度減產(chǎn)。
④催蕾及出菇管理與常規(guī)同，采收記重時(shí)記錄每組的采收時(shí)間和采收菇重，統(tǒng)計(jì)分析時(shí)每組剔除1袋最差的，其余統(tǒng)計(jì)分析比較平均生物轉(zhuǎn)化率、開(kāi)始出菇時(shí)間和清床時(shí)間；保留生物轉(zhuǎn)化率最高、周期最短的2個(gè)菌株；淘汰的菌株對(duì)應(yīng)的保藏原種停止保藏，保留的2個(gè)菌株對(duì)應(yīng)的保藏原種在有效期內(nèi)輪流轉(zhuǎn)擴(kuò)栽培種投人生產(chǎn)。
4 草菇母種轉(zhuǎn)管篩選
轉(zhuǎn)管前要將種源在29～31℃的環(huán)境下培養(yǎng)24～48h，轉(zhuǎn)管時(shí)要做到空白斜面無(wú)冷凝水，接種塊大小一致，規(guī)格3mm×3mm～4mm×4mm，菌種塊直接掉到底部，不要在培養(yǎng)基上劃過(guò)，29～31℃環(huán)境下避光培養(yǎng)。
?、俳臃N后24h，觀察萌動(dòng)情況，正常12h萌動(dòng)；
?、诮臃N后48h，觀察菌絲生長(zhǎng)情況：a基內(nèi)菌絲整齊濃密，纖細(xì)有力呈銀灰色，生長(zhǎng)速度快；氣生菌絲爬壁能力強(qiáng)，長(zhǎng)勢(shì)整齊一致的繼續(xù)培養(yǎng)；b基內(nèi)菌絲很稀疏，氣生菌絲長(zhǎng)勢(shì)混亂，氣生菌絲發(fā)白，氣生菌絲遠(yuǎn)比基內(nèi)菌絲多或者感染雜菌，出現(xiàn)其中一種情況要剔除；c相對(duì)a而言，生長(zhǎng)速度略慢，標(biāo)注后對(duì)比培養(yǎng)（有些種塊在接種時(shí)燙傷而萌動(dòng)慢造成的，后期培養(yǎng)指標(biāo)合格可以使用）；
?、劢臃N后72h，觀察氣生菌絲的爬壁能力，將爬壁能力較弱的剔除；
?、芙臃N后84～120h，正常菌絲滿管，比較檢查時(shí)要將培養(yǎng)不同天數(shù)滿管的標(biāo)注并分開(kāi)（分成3類(lèi)）；培養(yǎng)144h未滿管的剔除；
?、萁臃N后156～240h，正常菌絲出現(xiàn)磚紅色厚垣孢子，每天檢查，出現(xiàn)厚垣孢子后，標(biāo)注出現(xiàn)日期，當(dāng)天放置到18～22℃環(huán)境避光保存（保藏時(shí)將不同天數(shù)滿管的分開(kāi)放）；培養(yǎng)240h未出現(xiàn)厚垣孢子的剔除。
注：斜面母種在30d有效保藏期內(nèi)使用的，對(duì)于同一批次同一品種的，優(yōu)先使用菌絲先長(zhǎng)滿的；在菌絲同一天長(zhǎng)滿的里面優(yōu)先使用先出現(xiàn)厚垣孢子的。
5 原種和栽培種的篩選
生產(chǎn)原種和栽培種之前，在接種前48h，取出保藏菌種置于29～31℃下恢復(fù)培養(yǎng)。
原種的篩選標(biāo)準(zhǔn)：以生長(zhǎng)速度、菌絲色澤和健壯程度、厚垣孢子出現(xiàn)早晚為基準(zhǔn)；采用標(biāo)準(zhǔn)棉子殼配方29～31℃培養(yǎng)，一般48～72h封面，8～10d長(zhǎng)滿，12～15d出現(xiàn)厚垣孢子，10d內(nèi)未長(zhǎng)滿的淘汰；菌絲纖細(xì)有力呈銀灰色的保留，菌絲變濃白或局部變濃白的的淘汰；由于配方以及含水量的不同，上述參數(shù)會(huì)有所不同，根據(jù)實(shí)際情況選擇菌絲外觀好生長(zhǎng)速度快的原種，出現(xiàn)厚垣孢子早的更好。
栽培種的篩選與原種基本相同，差異在時(shí)間上，一般使用標(biāo)準(zhǔn)配方在29～31℃培養(yǎng)，48h封面，7～10d長(zhǎng)滿，11～14d出現(xiàn)厚垣孢子，10d內(nèi)未長(zhǎng)滿的淘汰。
6 菌種保藏期限
草菇母種出現(xiàn)厚垣孢子之后立即置于18～22℃環(huán)境避光保藏，30d內(nèi)使用最佳，最長(zhǎng)不超過(guò)60d，草菇原種出現(xiàn)厚垣孢子之后立即置于18～22℃環(huán)境避光保藏，20d內(nèi)使用；草菇栽培種出現(xiàn)厚垣孢子之后最好立即使用，18～22℃下保藏前3天效果最佳，最多存放7d。
注意事項(xiàng)：
?、僭诓莨缴鲜褂玫脑嚬芘囵B(yǎng)基，要注意以下幾點(diǎn)：
a.培養(yǎng)基在配制至分裝前，做到攪拌均勻，防止因試管內(nèi)營(yíng)養(yǎng)差異影響對(duì)菌絲優(yōu)劣的判斷；
b.試管培養(yǎng)基滅菌后冷卻、擺斜面時(shí)要防止出現(xiàn)大量冷凝水，培養(yǎng)基溫度在55～60℃的時(shí)候出鍋，溫度過(guò)高冷凝水多，溫度過(guò)低容易凝固；斜面擺好后要立刻覆蓋一些潔凈的保溫材料，防止凝固時(shí)產(chǎn)生大量冷凝水；如果少量定型的斜面存在冷凝水，應(yīng)剔除；如果大多數(shù)試管都產(chǎn)生冷凝水，可在較密閉的干凈箱體內(nèi)放置干燥劑（如生石灰塊）對(duì)試管進(jìn)行干燥，待斜面上冷凝水除去后立即停止干燥。
②際準(zhǔn)草菇菌種配方：棉子殼84%，麩皮12%，輕質(zhì)碳酸鈣2%，生石灰2%，料水比1∶1；滅菌后pH≤6.0。根據(jù)棉子殼的質(zhì)量?jī)?yōu)劣，酌情添加1%蔗糖。
?、壑芷诘陌才牛涸诟鱾€(gè)環(huán)節(jié)都穩(wěn)定的情況下，一般組織分離、出菇試驗(yàn)90d做一次，如果出現(xiàn)高產(chǎn)菇房，立即做組織分離和出菇試驗(yàn)。一次組織分離到出菇試驗(yàn)結(jié)束需要40d，每次接試管到出現(xiàn)厚垣孢子需要7～10d，每次轉(zhuǎn)管出現(xiàn)厚垣孢子保藏20d需要進(jìn)行下1次轉(zhuǎn)管（每次轉(zhuǎn)管的盡量在保藏1個(gè)月內(nèi)使用），允許轉(zhuǎn)管3次。
