接種是食用菌生產(chǎn)中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一，如果接種技術(shù)不過關(guān)，即會造成雜菌污染，成活率低而前功盡棄，更談不上栽培了。無論是菌種分離、傳代還是擴(kuò)繁，都要在無菌條件下嚴(yán)格按照無菌操作規(guī)程進(jìn)行。具體要點如下：
1 人員素質(zhì)
1.1 接種人員要具備認(rèn)真、細(xì)致、自覺、對事業(yè)負(fù)責(zé)的精神。
1.2 接種人員要牢固樹立無菌觀念，不能存在僥幸心理，切不可麻痹大意。
1.3 接種人員具備鑒別菌種優(yōu)勢的能力，不合格的菌種不能用于生產(chǎn)。
2 環(huán)境消毒
2.1 新制作的或是閑置時間超過15天的接種箱，首次使用前，箱體內(nèi)、外需用0.1%升汞水或2%來蘇兒徹底刷洗消毒。
2.2 閑置超過30天的接種室和緩沖間重新使用前，墻壁需用2%來蘇兒噴濕消毒。對新改建或閑置3個月以上沒用的接種室，使用前，室內(nèi)墻壁要用石灰漿粉刷，水泥地面用清水沖刷。
3 空間消毒
將待接種的培養(yǎng)基放入接種箱或接種室后，需對箱或室內(nèi)進(jìn)行空間消毒。
3.1 如果是母種傳代或接種量少的原種，可利用接種箱同時放入所用的接種工具，然后用化學(xué)藥物熏蒸或紫外線照射進(jìn)行空間消毒30分鐘。
3.2 如果是量大的原種或三級種生產(chǎn)，培養(yǎng)基放入接種室，同時放入所用的接種工具，再用化學(xué)藥物熏蒸，同時配合紫外線照射進(jìn)行空間消毒40分鐘左右。
3.3 緩沖間內(nèi)放置作業(yè)服、消毒水、面盆等，接種前要在緩沖間內(nèi)做好一切準(zhǔn)備工作。進(jìn)入前開啟紫外線燈照射30分鐘，離開緩沖間進(jìn)入接種室時仍需開啟紫外線燈照射，直至接種結(jié)束。
4 攜帶物消毒
4.1 將母種試管或原種瓶（袋）的棉塞齊管或瓶口剪去，母種試管用75%酒精棉擦洗外壁，原種瓶（袋）用0.25%高錳酸鉀水清洗外壁，然后隨接種人員帶入接種箱（室）。
4.2 接種人員經(jīng)過緩沖間更衣、洗手進(jìn)入接種室后不得隨便出入，盡量少走動和避免空氣對流。
5 殺菌 利用酒精火焰進(jìn)行必要的殺菌。
5.1 首先將接種工具（鉤、鏟、刀等）在酒精燈火焰上燒灼后，置于清潔的空試管內(nèi)冷卻備用。
5.2 將試管母種或原種瓶放在萬能夾上，旋轉(zhuǎn)式取下棉塞，右手端起酒精燈，讓火焰接觸管口或瓶口，左手將試管或原種瓶慢慢旋轉(zhuǎn)3～4周，然后將試管或原種瓶固定牢。
6 接種 母種分離、傳代或擴(kuò)繁時，試管口要控制在離酒精火焰10cm范圍內(nèi)進(jìn)行操作。
6.1 用殺菌后的備用接種鉤，除去母種斜面的尖端部分以及中央的母種塊，隨后將接種鉤放回母種試管。
6.2 左手持預(yù)接種的試管培養(yǎng)基，管口稍向下傾斜，用右手小拇指和無名指、食指和中指持接種鉤，從母種試管內(nèi)鉤取直徑約2mm大小的種塊，放入預(yù)接種培養(yǎng)基斜面中央，抽出接種鉤，放回母種試管，輕燎右手所持棉塞，旋轉(zhuǎn)式塞入接過菌的試管，由右手放到適當(dāng)位置，連續(xù)完成所有預(yù)接種試管。
注意：
?、?、每次接種時間最長不得連續(xù)超過2小時。
②、操作時，接種工具尖端和種塊不能接觸到管口和外部其它物體。工具尖端碰到外面物體要重?fù)Q工具，種塊碰到外面物體則作廢。
?、?、一般用種量：每支試管母種可擴(kuò)繁一級種100支左右；擴(kuò)接原種6～8瓶。
7 兩種特殊接種法
7.1 密環(huán)菌傳代擴(kuò)繁時，要趁培養(yǎng)基有凝結(jié)水時進(jìn)行，接人種塊直徑不能小于0.5mm，同時還要帶有菌索。每支試管培養(yǎng)基可同時接入3塊母種，每塊母種都要用接種工具按壓至母種塊陷入培養(yǎng)基約2mm，以利菌索盡快伸入培養(yǎng)基；接種原種時，每支試管可接種原種3～4瓶。
7.2 元蘑菌傳代擴(kuò)繁時，種塊直徑不能小于0.3mm。接種時，將種塊從試管培養(yǎng)基尾部約1.5cm處順斜面中間縱向劃線至斜面尖端約2cm處放下種塊，此法可使培養(yǎng)周期縮短3天左右。
8 安全 8.1 點燃的酒精燈不能靠近棉塞、塑料等易燃物。
8.2 點燃的酒精燈要放牢，在操作過程中嚴(yán)防將酒精燈碰翻，以免引起火災(zāi)。
8.3 接種箱或接種室利用化學(xué)藥物進(jìn)行空間消毒時，要計算空間容積，按照用藥說明使用，不許任意加大用藥量，避免造成藥害。
8.4 紫外線可損傷人體，特別是可引起電光性眼炎。因此，不要在開啟紫外線燈的情況下工作，更不能直視正在開啟的紫外線燈。
作者單位：吉林省蛟河市白石山林業(yè)局 楊儒欽 《特種經(jīng)濟(jì)動植物》2006.09
1 人員素質(zhì)
1.1 接種人員要具備認(rèn)真、細(xì)致、自覺、對事業(yè)負(fù)責(zé)的精神。
1.2 接種人員要牢固樹立無菌觀念，不能存在僥幸心理，切不可麻痹大意。
1.3 接種人員具備鑒別菌種優(yōu)勢的能力，不合格的菌種不能用于生產(chǎn)。
2 環(huán)境消毒
2.1 新制作的或是閑置時間超過15天的接種箱，首次使用前，箱體內(nèi)、外需用0.1%升汞水或2%來蘇兒徹底刷洗消毒。
2.2 閑置超過30天的接種室和緩沖間重新使用前，墻壁需用2%來蘇兒噴濕消毒。對新改建或閑置3個月以上沒用的接種室，使用前，室內(nèi)墻壁要用石灰漿粉刷，水泥地面用清水沖刷。
3 空間消毒
將待接種的培養(yǎng)基放入接種箱或接種室后，需對箱或室內(nèi)進(jìn)行空間消毒。
3.1 如果是母種傳代或接種量少的原種，可利用接種箱同時放入所用的接種工具，然后用化學(xué)藥物熏蒸或紫外線照射進(jìn)行空間消毒30分鐘。
3.2 如果是量大的原種或三級種生產(chǎn)，培養(yǎng)基放入接種室，同時放入所用的接種工具，再用化學(xué)藥物熏蒸，同時配合紫外線照射進(jìn)行空間消毒40分鐘左右。
3.3 緩沖間內(nèi)放置作業(yè)服、消毒水、面盆等，接種前要在緩沖間內(nèi)做好一切準(zhǔn)備工作。進(jìn)入前開啟紫外線燈照射30分鐘，離開緩沖間進(jìn)入接種室時仍需開啟紫外線燈照射，直至接種結(jié)束。
4 攜帶物消毒
4.1 將母種試管或原種瓶（袋）的棉塞齊管或瓶口剪去，母種試管用75%酒精棉擦洗外壁，原種瓶（袋）用0.25%高錳酸鉀水清洗外壁，然后隨接種人員帶入接種箱（室）。
4.2 接種人員經(jīng)過緩沖間更衣、洗手進(jìn)入接種室后不得隨便出入，盡量少走動和避免空氣對流。
5 殺菌 利用酒精火焰進(jìn)行必要的殺菌。
5.1 首先將接種工具（鉤、鏟、刀等）在酒精燈火焰上燒灼后，置于清潔的空試管內(nèi)冷卻備用。
5.2 將試管母種或原種瓶放在萬能夾上，旋轉(zhuǎn)式取下棉塞，右手端起酒精燈，讓火焰接觸管口或瓶口，左手將試管或原種瓶慢慢旋轉(zhuǎn)3～4周，然后將試管或原種瓶固定牢。
6 接種 母種分離、傳代或擴(kuò)繁時，試管口要控制在離酒精火焰10cm范圍內(nèi)進(jìn)行操作。
6.1 用殺菌后的備用接種鉤，除去母種斜面的尖端部分以及中央的母種塊，隨后將接種鉤放回母種試管。
6.2 左手持預(yù)接種的試管培養(yǎng)基，管口稍向下傾斜，用右手小拇指和無名指、食指和中指持接種鉤，從母種試管內(nèi)鉤取直徑約2mm大小的種塊，放入預(yù)接種培養(yǎng)基斜面中央，抽出接種鉤，放回母種試管，輕燎右手所持棉塞，旋轉(zhuǎn)式塞入接過菌的試管，由右手放到適當(dāng)位置，連續(xù)完成所有預(yù)接種試管。
注意：
?、?、每次接種時間最長不得連續(xù)超過2小時。
②、操作時，接種工具尖端和種塊不能接觸到管口和外部其它物體。工具尖端碰到外面物體要重?fù)Q工具，種塊碰到外面物體則作廢。
?、?、一般用種量：每支試管母種可擴(kuò)繁一級種100支左右；擴(kuò)接原種6～8瓶。
7 兩種特殊接種法
7.1 密環(huán)菌傳代擴(kuò)繁時，要趁培養(yǎng)基有凝結(jié)水時進(jìn)行，接人種塊直徑不能小于0.5mm，同時還要帶有菌索。每支試管培養(yǎng)基可同時接入3塊母種，每塊母種都要用接種工具按壓至母種塊陷入培養(yǎng)基約2mm，以利菌索盡快伸入培養(yǎng)基；接種原種時，每支試管可接種原種3～4瓶。
7.2 元蘑菌傳代擴(kuò)繁時，種塊直徑不能小于0.3mm。接種時，將種塊從試管培養(yǎng)基尾部約1.5cm處順斜面中間縱向劃線至斜面尖端約2cm處放下種塊，此法可使培養(yǎng)周期縮短3天左右。
8 安全 8.1 點燃的酒精燈不能靠近棉塞、塑料等易燃物。
8.2 點燃的酒精燈要放牢，在操作過程中嚴(yán)防將酒精燈碰翻，以免引起火災(zāi)。
8.3 接種箱或接種室利用化學(xué)藥物進(jìn)行空間消毒時，要計算空間容積，按照用藥說明使用，不許任意加大用藥量，避免造成藥害。
8.4 紫外線可損傷人體，特別是可引起電光性眼炎。因此，不要在開啟紫外線燈的情況下工作，更不能直視正在開啟的紫外線燈。
作者單位：吉林省蛟河市白石山林業(yè)局 楊儒欽 《特種經(jīng)濟(jì)動植物》2006.09
