1. 母種制備技術(shù) 從食用菌的孢子或子實(shí)體組織分離培養(yǎng)出來的第一次純菌絲體，稱為母種或者是一級菌種。由于第一次分離出的母種數(shù)量少，不能滿足生產(chǎn)的需要，進(jìn)一步擴(kuò)大培養(yǎng)后才能大 批量的生產(chǎn)。
      （1）使用的材料和器皿
      原料：馬鈴薯、葡萄糖或白糖、瓊脂。
      器皿：臺秤、燒杯、量簡、小鍋、漏斗、試管。
      材料：牛角匙、小刀、繩、棉花、紗布、紙。
      （2）配制方法和步驟
馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂、培養(yǎng)基的配方： 將馬鈴薯洗凈，去皮，如有芽眼去掉，稱取200克。切成花生豆大小的塊，量取1000毫 升水，倒入小鍋中，把切好的馬鈴薯塊一并倒入。開鍋后記時，維持20－3 0分鐘，加熱完 后用三層紗布過濾，去渣，得到馬鈴薯汁，如果馬鈴薯汁不足 1000毫升，補(bǔ)水1000毫升， 而后再倒入鋁鍋中，加人稱量好的瓊脂20克，加熱溶化，然后加葡萄糖25克溶解，即得到 培養(yǎng)基。培養(yǎng)基做好后即可分裝試管，用棉塞塞入試管的深度1寸左右 為宜。把培養(yǎng)基倒人漏斗內(nèi)分裝試管，每支裝量1寸左右，分裝完畢后每5－6支一組，用雙層報紙捆成捆，將捆成捆的培養(yǎng)基放進(jìn)滅菌鍋內(nèi)滅菌，然后在試管上蓋上報紙，將滅菌鍋冷凝管插入內(nèi)筒小孔內(nèi)，將螺母對稱扣緊，加熱滅菌30分鐘，最后晾斜面，凝固后備用。
      接種和培養(yǎng)： 接種室和接種箱在使用前進(jìn)行清潔消毒，一般用紫外線燈照射半小時，或用甲醛加5克高錳酸鉀密閉熏蒸4個小時。接種前，接種人員要用酒精擦拭雙手，試管及一切接種設(shè)備，進(jìn)行表面消毒，試管上貼上標(biāo)簽，注明菌種名稱，接種日期和接種人姓名。
      接種時，選擇菌絲健壯，生長旺盛，無老化，沒有感染雜菌的母種試管，在消過毒的無菌室或接種箱內(nèi)，按無菌操作要求進(jìn)行操作，接種鏟用酒精消毒，再在酒精燈火焰上灼燒滅菌，將接種鏟放在接種試管內(nèi)冷卻，迅速轉(zhuǎn)移到母管內(nèi)，將菌絲及培養(yǎng)基挑起綠豆大小一塊快速移入另一支斜面培養(yǎng)基中央定植。迅速將接種鏟拿出，在酒精燈火焰旁塞緊棉塞兒，然后將試管捆成捆，放入恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)。在25℃條件下培養(yǎng)7天，菌絲就可以長滿試管。制作原料要避光，防潮、防雜菌感染。每支母管可擴(kuò)大20－80支新管。