藥用真菌高質(zhì)量總DNA的制備及基因組文庫的構(gòu)建

A METHOD FOR PREPARATION OF HIGH QUALITY GENOMIC DNA FROM MEDICINAL FUNGI AND CONSTRUCTION OF A GENOMIC LIBRARY

程度　黃翔宇　李寶健　

分類號(hào)：Q939.96 　文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1007-3515(2002)01-0137-0139

　　靈芝、姬松茸、灰樹花等藥用真菌對腫瘤、肝炎、心血管疾病等具有良好的療效,已引起國際醫(yī)學(xué)界的矚目.現(xiàn)對藥用真菌的研究逐漸深入到分子水平,而提取基因組DNA是進(jìn)行藥用真菌分子生物學(xué)研究的基本技術(shù)之一.目前適用于靈芝等擔(dān)子菌綱大型藥用真菌DNA提取的方法報(bào)道較少.按照曲霉等絲狀真菌DNA的提取方法提取靈芝、姬松茸、灰樹花的基因組DNA時(shí),不但未能有效除去DNA的多糖,而且所得DNA片段小,構(gòu)建文庫時(shí)的轉(zhuǎn)化率低.為此我們建立了一種快速提取高質(zhì)量基因組總DNA的技術(shù),并在此基礎(chǔ)上探索出一種構(gòu)建高質(zhì)量基因組文庫的方法,為以后進(jìn)行有關(guān)的藥用真菌分子生物學(xué)研究奠定了基礎(chǔ).……

基金項(xiàng)目：廣東省重點(diǎn)科技攻關(guān)項(xiàng)目(99-Z-021-01)

作者簡介：程度(1972),男,河南人,博士,從事藥用真菌的基因工程研究.E-mail:lsbrc12@zsu.edu.cn.

作者單位：程度（中山大學(xué)生物工程研究中心,廣州,510275）　

　　　　　黃翔宇（中山大學(xué)生物工程研究中心,廣州,510275）　

　　　　　李寶健（中山大學(xué)生物工程研究中心,廣州,510275）　

參考文獻(xiàn)：

［1］J.薩姆布魯克等,1989. 分子克隆實(shí)驗(yàn)指南(第二版).金冬雁等譯(1999).北京,科學(xué)出版社.1～1062

［2］Donglu Zhang, et al., 1996. A method for the large scale isolation of high transformation efficiency fungal genomic DNA. FEMS Microbiology Letter 145:261-265

［3］HE YQ, 2000. An improved protocol for fungal DNA preparation. 菌物系統(tǒng), 19(3):434